产品详情
植物叶绿素含量检测试剂盒说明书
微量法
规格:100T/96S
产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致
溶液的配制:
1、 提取液:自备无水乙醇和丙酮,将无水乙醇:丙酮(V:V)=1:2 混合待用,提供一个 125mL 空瓶。
产品说明:
植物叶绿素广泛存在于绿色植物组织中,是光合作用的细胞器。其含量与光合作用、营养状况密切相关,是反应植物生长状况的重要指标。
叶绿素a和叶绿素b在645nm和663nm处有最 大吸收,根据经验公式可计算得叶绿素a和叶绿素b以及总叶绿素的含量。
注意:实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板(建议使用非聚苯乙烯材质的96孔板)、可调式移液枪、天平、研钵/匀浆器、锡箔纸、蒸馏水、10mL试管、无水乙醇和丙酮。
操作步骤:
一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)
1. 取新鲜植物叶片或其它绿色组织,用蒸馏水洗干净,然后吸干表面水分,去掉中脉,称取约 0.1g,剪碎放入研钵或匀浆器中。
2. 加入 1mL 蒸馏水,少量试剂一(约 10mg),在黑暗或弱光条件下充分研磨,转入 10mL 试管中。
3. 用提取液冲洗研钵,将所有冲洗液转入 10mL 试管中,用提取液定容至 10mL,置于黑暗条件下或者包上锡箔纸浸提 3h,观察底部组织残渣颜色接近于白色则提取完全,若组织残渣未完全变白,继续浸提至组织残渣颜色接近于白色。
二、测定步骤
注意事项:
1、 叶绿素对光敏感,研磨和提取等操作尽量避光或者在弱光下进行。
2、 一定要浸提至组织残渣完全变白,否则提取不充分。
3、 用提取液冲洗研钵一定要冲洗至所有的绿色物质被转移至EP管。
4、 测定时吸光值超过1,可进行适当稀释;当吸光值小于0.05时,可以适当减少V提取的用量,注意计算公式中改变V提取数值。
5、 若使用聚苯乙烯材质的96孔板进行测定,请在5min内尽快测定完成。
实验实例:
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!