产品详情
植物原花青素(OPC)含量检测试剂盒说明书
微量法
规格:100T/48S
产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致
溶液的配制:
1.试剂二:临用前加 8 mL 提取液,充分溶解。配制好的试剂二应尽快使用,2-8℃保存时间不超过一个月;
2.标准品:10 mg 原花青素。临用前加入 1mL 提取液,充分溶解得到 10 mg/mL 标准液,4℃保存两周;
3.工作液:临用前按照用量将试剂一和试剂二按照 1:1 混合,现用现配。用多少配多少。
产品说明:
原花色素(Oligomeric Proantho Cyanidins,OPC)是一类黄烷醇单体及其聚合体的多酚化合物,广泛存在于植物的各种器官中,具有极强的抗氧化性和清除自由基的作用,广泛的应用于医药,食品,化妆品,保健品行业。在酸性条件下,植物原花青素A环上的间苯二酚和间苯三酚与香草醛发生缩合反应,产生有色化合物,在500nm处有特征吸收峰,测定500nm光吸收值,可计算植物中原花青素的含量。
技术指标:
最 低检出限:0.0513 mg/mL
线性范围:0.078-5 mg/mL
注意:实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、天平、台式离心机、粉碎仪、超声清洗仪、30-50目筛和蒸馏水。
操作步骤:
一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)
将样本烘干至恒重,粉碎,过 30-50 目筛之后,称取约 0.1g,加入 1mL 提取液,用超声提取法进行提取(功率 300W,温度 25℃,时间 30min);12000rpm,25℃离心 10min,取上清,用提取液定容至 1mL,待测。
二、测定步骤
1. 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至500nm,分光光度计用蒸馏水调零。
2. 标准溶液制备:将10mg/mL标准液用提取液稀释为4、2.5、1.25、0.625、0.3125、0.15625mg/mL的标准溶液。
3. 标准液稀释可参考下表:
4. 操作表
三、OPC 计算公式
1. 根据标准管的浓度(x,mg/mL)和吸光度ΔA标准(y,ΔA标准),建立标准曲线。根据标准曲线,将ΔA测定(y,ΔA测定)带入公式计算样本浓度(x,mg/mL)。
2. OPC的计算:
(1)按样本质量计算:OPC含量(mg/g 质量)=x×V提取÷W=x÷W
(2)按样本蛋白浓度计算:OPC含量(mg/mg prot)=x×V提取÷(Cpr×V提取)=x÷Cpr
V提取:加入提取液体积,1mL;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g。
注意事项:
1、如果测定吸光值超过线性范围吸光值,可以增加样本量或者稀释样本后再进行测定,注意同步修改计算公式。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!