产品详情
纤维素酶(CL)活性检测试剂盒说明书
微量法
规格:100T/48S
产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致
溶液的配制:
标准品:10mg 无水葡萄糖(干燥失重<0.2%)。临用前加入 1mL 蒸馏水溶解,配制成 10mg/mL 葡萄糖溶液备
用,4℃可保存 1 周,或者用饱和苯甲酸溶液溶解,可保存更长时间。
产品说明:
CL(EC 3.2.1.4)存在于细菌、真菌和动物体内,能够催化纤维素降解,是一类可广泛应用于医药、食品、棉纺、环保及可再生资源利用等领域的酶制剂。
采用3,5-二硝基水杨酸法测定CL催化纤维素降解产生的还原糖的含量。
注意:实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96 孔板、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。操作步骤:
一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)
1、细菌或细胞:收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照每 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液,超声冰浴破碎细菌或细胞(功率 20%,超声 3 秒,间隔 10 秒,重复 30 次);8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
2、组织:称取约 0.1g 组织加入 1mL 提取液,冰浴中匀浆。8000g ,4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
二、测定步骤
1、分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 540nm,蒸馏水调零。
2、标准品的准备:将标准品用蒸馏水稀释至 1、0.8、0.6、0.4、0.2、0.1、0mg/mL。
3、加样表(在 EP 管中依次加入下列试剂):
三、CL活力计算
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!