产品详情
土壤亮氨酸氨基肽酶(S-LAP)活性检测试剂盒说明书
微量法
注意:本产品试剂有所变动,请注意并严格按照该说明书操作。
规格:100T/48S
产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致
溶液的配制:
1、 试剂二:临用前取 1 瓶加入 1.875 mL 丙酮溶解,用不完的试剂 2-8℃保存一周。
产品说明:
S-LAP是一类能水解肽链N-末端为亮氨酸的酶,由土壤微生物分泌。S-LAP活性变化与机体某些病理状态密切相关。
S-LAP分解L-亮氨酸对硝基苯胺生成对硝基苯胺,后者在405nm有最 大吸收峰,通过测定吸光值升高速率来计算S-LAP活性。
注意:实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、天平、离心机、水浴锅、研钵、甲苯(不允许快递)、丙酮(不允许快递)、30-50目筛、蒸馏水。
操作步骤:
一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)
取新鲜土样自然风干或 37℃烘干,过 30-50 目筛。
二、测定步骤
1、 分光光度计/酶标仪预热30min以上,波长调至405nm,分光光度计蒸馏水调零。
2、 加样表:
三、酶活计算公式
实验实例:
1、 称取两管 0.03g 三叶草土样,分别记为测定管和对照管,按照测定步骤操作,用 96 孔板测得计算ΔA=A 测定管-A 对照管=0.6-0.17=0.43,计算酶活得:
S-LAP 活性(U/g 土样)=0.507×ΔA÷W=0.507×0.43÷0.03=7.267 U/g 土样。
2、 称取两管 0.03g 土样,分别记为测定管和对照管,按照测定步骤操作,用 96 孔板测得计算ΔA=A 测定管-A 对照管=0.569-0.128=0.441,计算酶活得:
S-LAP 活性(U/g 土样)=0.507×ΔA÷W=0.507×0.441÷0.03=7.4529 U/g 土样。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!