产品详情
组织铁含量检测试剂盒说明书
可见分光光度法
规格:50T/48S
产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致
溶液的配制:
1、 试剂一:临用前配制,加入 7.5 mL 蒸馏水充分溶解,试剂一变黑后则不能使用;
2、 试剂二:临用前配制,加入 375 μL 冰醋酸,加入 12 mL 蒸馏水充分溶解;溶解后 4℃保存一周;
3、 标准液:1 μmol/mL Fe3+标准液。临用前稀释 8 倍即 0.125 μmol/mL 的标准溶液进行实验,现用现配。
产品说明:
铁是人体必须的微量元素之一,它是血红蛋白、肌红蛋白、细胞色素及其他酶系统的主要成分,帮助氧的运输,促进脂肪氧化。缺乏铁元素容易造成贫血、代谢纷乱,并影响机体的免疫功能。
亚硫酸钠还原Fe3+生成Fe2+,Fe2+进一步与2, 2’-联吡啶显色,在520nm处有吸收峰,测定该波长吸光度即可计算铁含量。
技术指标:
最 低检出限:0.00009449 μmol/mL
线性范围:0.0039-0.25 μmol/mL
注意:实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计、低温离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵/匀浆器、氯仿、冰和蒸馏水。
操作步骤:
一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)
称取约 0.1g 组织,加入 1mL 提取液进行冰浴匀浆。4000g 4℃离心 10 分钟,取上清。
二、测定步骤
1. 可见分光光度计预热30min,波长调至520nm。蒸馏水调零。
2. 加样表:
三、组织铁含量计算
1.按组织质量计算
组织铁含量(μg/g 质量)=(C标准液×ΔA测定÷ΔA标准)×V提取×55.845÷W=6.98×ΔA测定÷ΔA标准÷W
2.按组织蛋白浓度计算
组织铁含量(μg/mg prot)=(C标准液×ΔA测定÷ΔA标准)×V提取×55.845÷(Cpr×V提取)
=6.98×ΔA测定÷ΔA标准÷Cpr
C标准液:0.125μmol/mL Fe3+标准液;Cpr:样本蛋白浓度,mg/mL;W:样本质量,g;V提取:提取液体积,1mL;55.845:
Fe的相对分子质量,55.845μg/μmol。
注意事项:
1、 当ΔA大于0.9时,建议将样本用提取液稀释后进行测定。
2、 试剂一溶解变黑后则不能使用;试剂二有毒性,做好防护措施。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!