PCold3

启动子:CspA promoter

复制子:F1 ori,ori

质粒分类:大肠系列质粒；大肠表达质粒；pCold系列质粒

质粒大小:4377bp

原核抗性:氨苄青霉素Amp（100μg/ml）

克隆菌株:DH5α等大肠杆菌

培养条件:37℃，有氧，LB

表达宿主:BL21等大肠杆菌

培养条件:37℃，有氧，LB

诱导方式:IPTG或乳糖及其类似物

5'测序引物:pCold-F（ACGCCATATCGCCGAAAGG）

3'测序引物:pCold-R（GGCAGGGATCTTAGATTCTG）

质粒简介

         pCold III质粒是利用冷休克基因CspA启动子设计高效率蛋白质表达载体。在启动子下游处，插入了lac操纵子，以便严格控制表达。此外，5’非翻译区（5’UTR），翻译增强元件（TEE）,His标签序列，Xa因子切割位点和多克隆位点（MCS）位于CAPS启动子的下游。当培养温度切换到低温时，大肠杆菌暂时停止生长，大部分的大肠杆菌蛋白质表达减少，但是一类称为冷休克蛋白的蛋白质被特异性诱导表达。

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