产品详情
微量蛋白沉淀试剂盒
产品及特点
本产品用于微量沉淀浓缩蛋白质样品,其原理是通过酸使蛋白质变性,溶解度降低,在离心条件下沉淀,而达到蛋白变性、蛋白浓缩、蛋白去盐的目的。他们还有一个重要的用途是去除污染的盐离子和其他小分子。本系列产品名单如下:
它们具有下列特点:
1.操作方便迅速,只需要混匀后离心,不需要其他仪器。
2.产品稳定,可室温长期放置。
3.可以处理各种液体样品(如细胞或细菌培养物,细胞裂解物,蛋白质提取物等)。
4.浓缩效果强,可浓缩浓度低达1ug/mL的蛋白。
5.可用于含SDS的样品,但灵敏度稍低(5 ug/ mL)。
6.得到的蛋白质可用于后续的SDS-PAGE、免疫沉淀和质谱分析等实验。但蛋白已经变性,没有活性。
规格及成分
运输及保存 常温运输和保存,有效期一年。
自备试剂 1M Tris-HCl,pH8.8(也许会用到)
使用方法
使用方法一(用于不含SDS的禅品。但禅品蛋白浓度不能低于1 ug/mL)
1、将100L需要沉淀浓缩的蛋白样品转移到一个自备的1.5 mL塑料离心管中。
2、加入10 uL溶液A,涡旋激烈震荡10-30秒混匀。
3、冰上放置15分钟。
4、加入10 uL溶液B,轻轻混匀。
5、冰上放置60分钟。
6、4℃12000-15000×g离心10分钟。
7、小心移弃上清液,保留蛋白沉淀。
8、加入1 mL冰浴的溶液C,震荡混匀后4℃12000-15000×g离心15分钟。
9、小心移弃上清液,保留蛋白沉淀。
10、短暂离心,小心移弃残留上清液后,将有蛋白沉淀的离心管敞开放置在冰上,空气晾干。一般需要10分钟左右。
11、样品放4℃保存或立即电泳检测。可直接用1×SDS-PAGE上样液或其他电泳缓冲液溶解蛋白沉淀,取适量上样。如果蓝色的溴酚蓝染料变黄,则说明有残留酸性物质TCA污染,必须加少量自备的1M Tris-HC1 (pH8.8)缓冲液,直到颜色变成蓝色为止,否则将影响电泳结果。
使用方法二(用于含SDS的样品。但样品蛋白液度不能低于5 ug/mL)
1、将200 L需要沉淀浓缩的蛋白样品(浓度不低于5ug/mL)转移到一个自备的1.5 mL塑料离心管中。
2、加入8L溶液B,涡旋激烈震荡10-30秒混匀。
3、冰上放置30分钟或-20℃放置15分钟(过夜放置更好)。
4、4℃ 12000-15000×g离心15分钟。
5、小心移弃上清液,保留蛋白沉淀。
6、加入1 mL冰浴的溶液C,震荡混匀后4℃ 12000-15000×g离心15分钟。
7、小心移弃上清液,保留蛋白沉淀。
8、短暂离心,小心移弃残留上清液后,将有蛋白沉淀的离心管敞开放置在冰上,空气晾干。一般需要10分钟左右。
9、样品放4℃保存或立即电泳检测。可直接用1×SDS-PAGE上样液或其他电泳缓冲液溶解蛋白沉淀,取适量上样。如果蓝色的溴酚蓝染料变黄,则说明有残留酸性物质TCA污染,必须加少量自备的1M Tris-HCl (pH8.8)缓冲液,直到颜色变成蓝色为止,否则将影响电泳结果。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!