脂质体 2000 转染试剂

Lip2000 Transfection Reagent

产品规格：0.75ml / 1.5mL

保存条件：2-4℃保存一年（避免冷冻）

产品简介：

Lip2000 是一种新型的阳离子脂质体转染试剂。适合于将核酸（DNA 和 RNA）转染入真核细胞，具有低细胞毒性；对多种类型的细胞和培养板都具有高转染效率；转染时血清的存在不影响转染效率的优点。适用范围：贴壁细胞和悬浮细胞（脯乳动物细胞系）的转染。
质粒 DNA 转染：
对大多数细胞来说，DNA（μg）与 Lip2000（μI）的比例为 1:2~3。转染时高的细胞密度可以得到高的转染效率和表达水平，并能减少细胞毒性。
1. 以 24 孔板为例
a. 贴壁细胞：转染前一天，用 500 μI 不含抗生素的培养基接种 0.5-2×105 细胞，使之 天能达到 70-90%汇合。
b. 悬浮细胞：在准备 DNA-Lip2000 复合物之前，用 500 μI 不含抗生素的培养基接种 4-8×105 细胞即可。
2. 对每个转染样品，进行以下操作
a. 在 eppendorf 管里分别加入 50 μI Opti-MEM I ReLipced Serum Medium 和 0.8 μg DNA，轻柔混匀，制成 DNA 稀释液。
b. 在另一个 eppendorf 管里分别加入 50 μI Opti-MEM I ReLipced Serum Medium 和 2.0 μI Lip2000（注意用前 先混 匀），轻柔混匀，制成 Lip2000 稀释液，室温静置 5 分钟。
c. 将 DNA 稀释液和 Lip2000 稀释液混合，轻柔混匀，室温静置 20 分钟，形成 DNA-Lip2000 复合物。DNA-Lip2000 复合物在室温下可稳定存在 6 小时。
3. 将 DNA-Lip2000 复合物加入到接种好的细胞中，将培养板轻轻地前后摇动，使复合物分散均匀。
4. 在 37℃ 二氧化碳培养箱中培养 4-6 小时后更换培养基，继续培养 18-48 小时。
5. 如果要筛选稳定细胞株，则在转染 24 小时后将细胞按照 1:10 或更高的比例接种到新鲜培养基中， 天加入选择性培养基进行筛选。
质粒 DNA 转染的优化为达到 的转染效率和降低细胞毒性的影响，可以对 DNA 和 Lip2000 的比例以及细胞密度进行优化，一般在 1: 0.5~5 的范围内优化 DNA （μg）和 Lip2000（μI）的比例。
不同细胞培养板中转染时培养基、核酸及 Lip2000 用量 

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！