产品详情
钙黄绿素乙酰甲酯
Calcein, AM
产品规格: 1mg
保存条件: -20℃干燥避光保存,有效期 1 年。
产品描述:
Calcein, AM 是一种可对活细胞进行荧光标记的细胞染色试剂,它穿透细胞膜进入细胞后被细胞内的 酯酶剪切形成 Calcein,从而被滞留在细胞内,发出强绿色荧光。与其它同类试剂(如 BCECF, AM 和 CFDA) 相比,Calcein, AM 的细胞毒性很低。
Calcein 的激发和发射波长分别为 490 nm 和 515 nm。 Calcein, AM 仅对活细胞染色。作为核染色染料的 PI 不能穿过活细胞的细胞膜,它穿过死细胞膜的无 序区域而到达细胞核,并嵌入细胞的 DNA 双螺旋从而产生红色荧光(激发:535 nm,发射:617 nm),因 此 PI 仅对死细胞染色。由于 Calcein 和 PI-DNA 都可被 490 nm 激发,因此可用荧光显微镜同时观察活细 胞和死细胞。用 545 nm 激发,仅可观察到死细胞。根据以上特点,Calcein, AM 和 PI 经常被结合用来作 为活细胞和死细胞的双重染色。
由于不同细胞系的最佳染色条件不同,我们建议个别确定 Calcein, AM 和 PI 的合适浓度。
产品性质:
使用方法
(1)用 DMSO 制备 1 mM 的 Calcein, AM 溶液,并用 PBS 将其稀释制成 1~50 μM 的 Calcein, AM 溶液。
注:如果 Calcein, AM 很难进入细胞,可以使用表面活性剂,如 Pluronic F127。
(2)将 1/10 细胞培养基体积的 Calcein, AM 溶液加入到细胞培养基中。注:也可以用 1/10 浓度的 Calcein,AM 溶液代替培养基。
(3)在 37℃培养细胞 15~30 分钟。
(4)用 PBS 或适当的缓冲液洗涤细胞两次。
(5)用 490 nm 激发波长,515 nm 发射波长的滤光片的荧光显微镜观察细胞。
注意事项
1. 荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!