产品详情
生物素抗体标记试剂盒
Biotin Conjugation Kit
产品规格: 标记 100ug-1mg 抗体
CAS: 9026-00-0
保存条件: 2-8℃保存,一年有效。勿冻存。
产品介绍:
生物素-亲和素系统(Biotin-Avidin—System,BAS)是一种应用非常广泛的生物反应放大系统。生物 素与亲和素间的作用是目前已知强度最高的非共价作用,,生物素与亲和素之间高亲合力的牢固结合以及 多级放大效应,使 BAS 免疫标记和有关示踪分析更加灵敏。生物素标记抗体是目前广泛用于免疫病理、细 胞化学、病理学及临床免疫中的特异、灵敏、定性和定位相结合的免疫化学试剂。在碱性条件下,活化的 生物素与蛋白质的自由氨基结合,生成标记的生物素化蛋白。 本试剂盒中的荧光素采用高质量进口的生物素(Biotin),生物素标记抗体的原理是利用生物素上的 -NHS 基团和抗体上游离的-NH2 发生化学形成 Biotin-抗体结合物。一般一个 IgG 分子可结合 2-8 个分子 的 Biotin。
产品组份:
注意事项:
1. 试剂盒保存在 2-8℃, 勿冻存。
2. 试剂盒组份在运输过程中可能造成颠倒,会使液体或干粉试剂沾到管壁或瓶盖上。使用前请离心处理,
以使附着管壁或瓶盖的液体或干粉试剂沉积到管底。
3. Biotin 需现用现配,溶解后的 Biotin 不能长期保存。
4. 纯化柱中的缓冲液含有毒性成分叠氮化钠(NaN3),使用时避免与皮肤,眼睛和黏膜接触。
5. DMSO 属微毒类,对人体皮肤有渗透性,对眼又刺激作用,使用时避免与皮肤,眼睛和黏膜接触。
6. 标记前抗体的透析,浓缩和浓度测定等操作都会造成抗体量的损失,因此标记前准备抗体时需根据具
体情况考虑最适宜的抗体量。
标记操作步骤:
1. 抗体准备
1.1. 建议抗体浓度在 1-2mg/ml 之间。
1.2. 抗体中不要含有 BSA 或其它蛋白质成分。
1.3. 抗体缓冲液中不要含有氨基的盐(如:Tris,NaN3等),pH 在 6.5-8.5 为宜。
2. 抗体标记
2.1. 取出 Biotin 离心数秒,将管中 Biotin 干粉甩至管底;
2.2. 管中加入 50ul DMSO 用移液枪反复吹打或 vortex 混匀至 Biotin 完全溶解;
2.3. 抗体中加入适量调整缓冲液(每 100ul 抗体中加入 10ul 调整缓冲液);
2.4. 将溶解后的 Biotin 加入抗体中(每 100ug 抗体中加入 4.0ul Biotin), 用移液枪反复吹打或 vortex混匀。
2.5. 将抗体-Biotin 混合物置水平摇床或旋转混匀仪,在摇动状态下室温避光(反应管可包裹锡箔纸)反应 1h。
注: 如果需要较高 Biotin 偶联比,可适当延长抗体和 Biotin 偶联时间。
3. 游离 Biotin 去除
3.1. 取出纯化柱,将纯化柱 3000rpm 离心 2min。
3.2. 暂时保留收集管中的缓冲液。
3.3. 将纯化柱移至新的收集管上,吸取抗体-Biotin 偶联物置纯化柱中填料的表面。如果样品体积小于50ul,应先用 3.2 保留的缓冲液将液体量补足 50ul。上样体积最大不要超过 100ul。
3.4. 待样品渗入填料后,3000rpm 离心 2min。
3.5. 将抗体-Biotin 标记物 4℃保存待用,终产品可 4℃可保存 1 年。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
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