产品详情
大鼠鼓膜表皮干细胞
一、细胞基本属性 | |
细胞名称 | 大鼠鼓膜表皮干细胞 |
组织来源 | 鼓膜 |
商品货号 | ORCR387 |
种属来源 | 大鼠 |
产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 |
细胞简介 | 鼓膜也称耳膜,为一弹性灰白色半透明薄膜,将外耳道与中耳隔开。鼓膜穿孔不能愈合,可能与干细胞受损或增殖抑制有关。鼓膜上皮干细胞的分布与鼓膜的血供丰富的区域一致。 鼓膜上皮干细胞高表达β1整合素,有很强的黏附型,对Ⅳ型胶原的黏附鼻其他细胞更快、更强。 |
包被条件 | PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%) |
培养基 | 大鼠鼓膜上皮干细胞专用培养基 |
换液频率 | 每2-3天换液一次 |
生长特性 | 贴壁 |
细胞形态 | 铺路石状细胞,不规则 |
传代特性 | 可传1-2代 |
消化液 | 0.25%胰蛋白酶 |
培养条件 | 气相:空气,95%;CO2,5% |
方法简介:澳睿赛实验室分离的大鼠鼓膜表皮干细胞采用先机械吹打、后胰蛋白酶消化,结合澳睿赛密度梯度离心法制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测:澳睿赛实验室分离的大鼠鼓膜表皮干细胞经PCK免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
大鼠鼓膜表皮干细胞体外培养周期有限;建议使用澳睿赛配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
二、细胞培养状态 发货时发送细胞电子版照片
二、使用方法 大鼠鼓膜表皮干细胞是一种贴壁细胞,细胞形态呈上皮细胞样,在澳睿赛技术部标准操作流程下,细胞可传1-2代;建议您收到细胞后尽快进行相关实验。
客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作。
1. 取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。
2. 贴壁细胞消化 1)吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次; 2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化; 3)用吸管轻轻吹打混匀,按传代比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的完全培养基至5mL,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养; 4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。
3. 细胞收货脱落 1)收集所有细胞悬液,1000rpm,离心5min,保留沉淀; 2)添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至离心管中,重悬沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min);消化完向离心管内加入5ml完全培养基终止消化; 3)经1000rpm,离心5min,丢弃上清,用5ml完全培养基(补加1%FBS,促进贴壁)重悬沉淀,接种于新的培养瓶内; 4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基(37℃预热)。
4. 细胞实验 因原代细胞贴壁特殊性,贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿(如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等)时,需要对实验器皿进行包被,以增强细胞贴壁性,避免细胞因没贴好影响实验;包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚赖氨酸PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%),依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。
三、注意事项
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和澳睿赛技术部沟通;由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。
5. 该细胞只可用于科研。
1)本产品未通过直接用于活体动物和人的审核
2)本产品未通过用于活体诊断的审核
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
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