产品详情
通用血清型程序冻存液
产品概述
冷冻保存是保存细胞的主要方法,对细胞的保种、引种、培养以及实验研究等具有重要意义。在冻存细胞时,为使细胞免受冷冻损伤,常常加入冷冻保护剂,目前使用最为广泛的是渗透型保护剂DMSO(二甲基亚砜),其保护机制是在细胞冷冻悬液完全凝固之前渗透到细胞内,在细胞内外产生一定的摩尔浓度,降低细胞内外的未结冰溶液中电解质的浓度,从而保护细胞免受高浓度电解质的损伤,同时细胞内的水分也不会过分外渗,避免了细胞过分脱水皱缩。但DMSO在常温下对细胞毒副作用较大,浓度较大时对细胞毒害作用较大,尤其是敏感的细胞,如杂交瘤细胞;一般情况下,DMSO使用终浓度在5%~15%时具有较好的效果。
通用血清型程序冻存液,由DMSO、进口胎牛血清(FBS)和DMEM/F12基础培养基组成,伴随着的发展,经过数百种细胞的验证,适用于各种哺乳动物原代细胞,传代细胞系和杂交瘤细胞等细胞的冻存,细胞存活率高,储存稳定,使用方便。
产品信息
形态 | 液体 |
规格 | 10mL×10 |
浓度 | 即用型 |
DMSO | 5% |
FBS | 40% |
DMEM/F12基础培养基 | 55% |
细胞存活率 | ≥ 90% |
细菌检查 | 阴性 |
真菌检查 | 阴性 |
支原体检查 | 阴性 |
储存条件 | 2~8℃或-5~-20℃,避光 |
运输条件 | 冷冻 |
有效期 | 2~8℃,3个月;-5~-20℃至少24个月 |
细胞冻存
1、选择对数生长期的细胞(90%左右),并保证在收获前24h内换液一次,收集细胞,并将细胞制备成单细胞悬液(贴壁细胞可能需要用胰酶消化),计数;
2、将细胞悬液1000r/min离心5min,弃上清;
3、向细胞沉淀物中加入冷冻液,轻轻吹打,使细胞密度达到105~106个/ml;
4、将上述细胞悬液按0.5ml~1.0ml的量,分装于无菌细胞冻存小管内,拧紧管盖,并做好标记;
5、按细胞冻存程序性降温步骤冻存细胞(2~8℃,40min;-20℃,30min~60min;-80℃,过夜;液氮保存)或使用程序降温盒降温后,再转移至液氮中保存。
细胞复苏
1、细胞复苏时,液氮中取出冻存管后,直接于37℃水浴中完全解冻(勿使水浸没冻存管口,而造成污染);
2、从37℃水浴中取出冻存管,酒精消毒后,吸出细胞悬液于10倍体积的培养液中,1000r/min离心5min,弃上清;
3、加入含血清的培养液重悬细胞,计数,调整细胞密度,接种培养瓶,37℃培养箱静置培养,次日更换一次培养液,继续培养。
注意事项
1、使用本产品时应注意无菌操作,避免污染;
2、2~8℃中解冻,摇匀后使用,请勿反复冻融,用量较少时建议分装冻存;
3、不宜长时间放置于室温环境中,初次融化后可在2~8℃避光保存至少一个月;
4、使用时如有少量蛋白析出,可以直接使用,不会影响冻存效果,也可离心去沉淀后使用;
5、冻存后的细胞请勿在-80℃保存超过一个月,长期保存应放置于液氮中;
6、冻存细胞时,请将细胞冻存管管盖拧紧,以免液氮內渗,而导致细胞复苏时发生冻存管炸裂危险;
7、因本品中含有DMSO,使用时请做好防护措施,避免与皮肤直接接触;
8、本产品仅用于科研或进一步研究使用,不用于诊断和治疗。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。