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苏州欣协生物科技有限公司
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产品详情

基本信息

[组件]

50 mL 红细胞裂解液 (10× )

 

[尺寸]

适用于 50 mL 全血

 

[存储]

避光储存在2-8°C。 不要冻结。有效期在小瓶标签上标明。

 

[背景资料]

红细胞裂解溶液(10×)已被开发用于红细胞的裂解,以确保红细胞的最佳裂解,对从组织样本或血液获得的所有细胞类型的影响最小。红细胞裂解后的洗涤步骤是可选的,具体取决于应用。该溶液适用于人,小鼠或大鼠来源的单细胞悬浮液中的红细胞裂解。

 

[应用]

● 人外周血或骨髓中的红细胞裂解。

● 小鼠或大鼠全血中的红细胞裂解。

● 从不同组织获得的单细胞悬液中红细胞裂解。

协议

[1×红细胞裂解液的制备]

1.1用双蒸水(ddH₂O)按10:1稀释红细胞裂解液(10×)的比例,例如,用1mL ddH₂O稀释10 mL红细胞裂解液(9×)。

▲注意事项:请勿用去离子水稀释。

1.2 将制备好的1×红细胞裂解液在室温下储存。在一天结束时丢弃未使用的溶液。

 

[2 红细胞裂解与洗涤步骤]

2.1.用10体积的1×红细胞裂解液稀释一体积的细胞悬液。

2.2处理血液样本时:涡旋5秒,在室温下孵育10分钟。

▲注意:如果样品在10分钟后不是透明的红色,再孵育2分钟。

处理组织样本时:

涡旋5秒钟,在室温下孵育2分钟。

2.3. 在室温下以 300× g 离心 5 分钟(最多 5 mL 的管)或 10 分钟(15 mL 或 50 mL 管)。完全吸出上清液。

2.4.将细胞沉淀重悬于适当的缓冲液中,然后继续进一步应用。

 

[3 红细胞裂解无洗涤步骤]

▲ 在流式细胞术分析前对细胞悬液进行荧光染色后,以及不需要缩小体积时,建议使用此程序进行红细胞裂解。

3.1 用 10 体积的 1× 红细胞裂解液稀释一体积的细胞悬液。

3.2涡旋5秒,在室温下在黑暗中孵育10分钟。

3.3 将样品储存在冰上并在一小时内进行分析。