产品名称：犬肝素辅因子Ⅱ(HCⅡ)Elisa试剂盒

产品规格：48T/96T

实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中指标水平。用纯化的指标抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入指标，再与HRP标记的-O-甲基转移酶（COMT）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过 洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的指标呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度

（OD值），通过标准曲线计算样品中指标浓度。

犬肝素辅因子Ⅱ(HCⅡ)Elisa试剂盒组成：

（1）结合物及标本的稀释液；

（2）洗涤液，在板式ELISA中，常用的稀释液为含0.05%吐温20磷酸缓冲盐水；

（3）酶标记的抗原或抗体（结合物）；

（4）酶的底物；

（5）阴性对照品和阳性对照品（定性测定中），elisa试剂盒参考标准品和控制血清（定量测定中）；

犬肝素辅因子Ⅱ(HCⅡ)Elisa试剂盒操作步骤：

1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4. 配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用

5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

7. 温育：操作同3。

8. 洗涤：操作同5。

9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟.

10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

11. 测定：以空白孔调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

计算

 以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，

即为样品的实际浓度。

犬肝素辅因子Ⅱ(HCⅡ)Elisa试剂盒注意事项

1.试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

2.实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。

3.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

4.使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。

5.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

6.洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

7.底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。

8.加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。

9.按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

10．试剂盒保存：；2-8℃。

11．有效期：6个月

犬肝素辅因子Ⅱ(HCⅡ)Elisa试剂盒其它相关产品：

YS06120B犬白介素18(IL-18)Elisa试剂盒

YS06121B 犬肾上腺髓质素(ADM)Elisa试剂盒

YS06122B 犬组胺(HIS)Elisa试剂盒

YS06123B 犬细胞间粘附分子1(ICAM-1/CD54)Elisa试剂盒

YS06124B 犬肌钙蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)Elisa试剂盒

YS06125B 犬肌红蛋白(MYO/MB)Elisa试剂盒

YS06126B 犬叶酸(FA)Elisa试剂盒

YS06127B 犬肾素(Renin)Elisa试剂盒

YS06128B 犬前列腺特异性抗原(PSA)Elisa试剂盒

YS06129B 犬乙酰胆碱受体抗体(AChRab)Elisa试剂盒

YS06130B 犬γ氨基丁酸(GABA)Elisa试剂盒

YS06131B 犬5羟色胺(5-HT)Elisa试剂盒

YS06132B 犬主要组织相容性复合体(MHC/DLA)Elisa试剂盒

YS06133B 犬白介素8(IL-8/CXCL8)Elisa试剂盒

YS06134B 犬维生素K1(VK1)Elisa试剂盒

YS06135B 犬维生素E(VE)Elisa试剂盒

YS06136B 犬双氢睾酮(DHT)Elisa试剂盒

YS06138B 犬甲状腺素(T4)Elisa试剂盒

YS06139B 犬三碘甲状腺原氨酸(T3)Elisa试剂盒

YS06140B 犬孕激素/孕酮(PROG)Elisa试剂盒

YS06141B 犬雌激素(E)Elisa试剂盒

YS06142B 犬骨桥素(OPN)Elisa试剂盒

YS06143B 犬胰岛素受体β(ISR-β)Elisa试剂盒

YS06144B 犬内皮素1(ET-1)Elisa试剂盒

YS06145B 犬血栓前体蛋白(TpP)Elisa试剂盒

YS06146B 犬血栓素B2(TXB2)Elisa试剂盒

YS06147B 犬内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)Elisa试剂盒

YS06148B 犬睾酮(T)Elisa试剂盒

YS06149B 犬促卵泡素(FSH)Elisa试剂盒

YS06150B 犬雌二醇(E2)Elisa试剂盒

YS06151B 犬β内啡肽(β-EP)Elisa试剂盒

YS06152B 犬促黄体生成激素(LH)Elisa试剂盒

YS06153B 犬血栓调节蛋白(TM)Elisa试剂盒

YS06154B 犬肝素辅因子Ⅱ(HCⅡ)Elisa试剂盒

YS06155B 犬转移生长因子β1(TGF-β1)Elisa试剂盒

YS06156B 小鼠凋亡诱导因子(AIF)Elisa试剂盒

YS06157B 小鼠热休克因子1(HSF1)Elisa试剂盒

YS06158B 小鼠血小板因子3(PF-3)Elisa试剂盒

YS06159B 小鼠白介素2受体(IL-2R)Elisa试剂盒

YS06160B 小鼠转化生长因子β2(TGFβ2)Elisa试剂盒

YS06161B 小鼠单核细胞趋化蛋白4(MCP-4/CCL13)Elisa试剂盒

YS06162B 小鼠信号转导分子7(Smad7)Elisa试剂盒