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Bst 4.0冻干Buffer(含冻干赋形剂)
商品属性:
货号 | 规格 | 产品名称 |
P-PR1261-2500Tx25 μl | 2500Tx25 μl | Bst 4.0冻干Buffer(含冻干赋形剂) |
产品介绍:
描述:
本品为 Bst3.0、4.0 DNA/RNA 聚合酶的专用冻干buffer 系统,为 2.5 倍浓度,包含了反应缓冲盐、Mg2+、冻干赋形剂,在配制体系时加入 dNTP、Bst4.0DNA/RNA 聚合酶后,直接进行冻干反应。无需再进行冻干保护剂的条件优化工作。
储存:-20℃保存 2 年;短期使用放置于 2-8℃,保存 3个月。反复冻融 10 次,不影响使用。如有白色沉淀,于37℃水浴放置 10min 后溶解沉淀,不影响使用。该 Buffer中含有 15 mM Mg2+,必要时可自行调整。
注意:本试剂仅适用于 生产的无甘油系列 Bst 3.0、4.0.
注意事项:
1. 配制冻干体系
2.5xBst4.0 Lyo Buffer 10 μl10 mM each dNTP 2.5 μlBst4.0 Glycerol Free(32U/ul) 0.2-0.5 μl12.5xLAMP Primer Mix 2 μlddH2O到总体积 15 μl
注意:(1)该混合物 15 μl 加入到 0.2ml EP 管后上机冻干。该反应体系设计为 25 μl 的终反应体系,冻干体积为15 μl。
(2) 12.5xLAMP Primer Mix 的配制,FIP/BIP 分别为20 μM、LoopF/B 分别为 5 μM、F3/B3 分别为 2.5 μM。2. 反应体系冻干完毕后冻干品中加入检测模板和 ddH20(总体积25 μl)即可进行 LAMP 等恒温扩增。
pcr相关试剂实验结果分析:
PCR实验结果的分析涉及多个方面,包括实验操作、试剂质量、实验条件等,这些因素都会影响PCR实验的成功率和结果的准确性。以下是对PCR实验结果分析的一些关键点:
循环次数过多:增加模板量减少循环次数,缩短退火时间及延伸时间,或改用两种温度的PCR循环,可以有效避免循环次数过多导致的问题。
退火温度过低:退火温度的适当调整对于PCR反应的成功至关重要,过低的退火温度可能导致非特异性扩增,影响结果的准确性1。
电泳体系问题:包括凝胶中缓冲液和电泳缓冲液浓度相差太大、凝胶没有凝固好、琼脂糖质量差等问题,这些都会影响DNA片段的分离效果。
试剂盒问题:运输储存不当可能引起试剂盒失效,试剂盒本身质量问题如引物选择、循环参数设置不当也可能导致实验失败1。
降解的陈旧模板:使用降解的陈旧模板进行扩增容易产生涂布,影响结果的解读1。
PCR假阴性结果:可能由引物长度不够、试剂浓度不标准、靶序列突变或缺失、循环参数设置错误、标本中有Taq酶抑制剂、PCR产物检测系统灵敏度不够等因素引起。
为了获得准确的PCR实验结果,需要注意以下几点:
确保PCR反应体系中各种试剂的配比和操作步骤的精准度。
在PCR反应过程中需要对PCR产物进行实时监测,以便及时对反应条件进行调整。
防止样本的污染和交叉感染,以免影响PCR反应的准确性和可靠性。
通过上述分析,可以更好地理解和控制PCR实验中的关键因素,从而提高实验结果的准确性和可靠性。
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