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pBM23快速克隆试剂盒(克隆载体 含自杀基因)
商品属性:
货号 | 规格 | 产品名称 |
P-PR1217-20次×3 | 20次×3 | pBM23快速克隆试剂盒(克隆载体 含自杀基因) |
产品介绍:
保存条件:-20 ℃保存
产品介绍:
pBM23 Toposmart克隆试剂盒利用痘苗病毒的拓扑异构酶I(Topoisomerase I)的切割再连接的特点将片段克隆到载体中。不仅适用于克隆由Pfu、sPfu、KOD、Xerox、Phusion和Q5等高保真DNA聚合酶扩增的平末端PCR产物,也可克隆由Taq、Taqplus、Tth和klenTaq等DNA聚合酶扩增的带A尾的PCR产物。试剂盒中的pBM23 载体为线性化的质粒。可以用引物对M13F(-47)和M13R(-48)进行菌落PCR鉴定阳性克隆。pBM23 载体的多克隆位点两侧还有SP6和T7启动子序列,可用于体外RNA转录。
产品特点:
(1)连接反应仅需5-30分钟。
(2)适用于平末端PCR产物和带A尾的PCR产物。
(3)载体采用了新的制备工艺,零背景,无需蓝白斑筛选。
(4)克隆位点两旁都有Sma I,适合单酶切鉴定。
(5)载体的多克隆位点两侧具有SP6和T7 RNA聚合酶启动子序列,可用于体外RNA转录。
(6)载体具有氨苄青霉素和卡那霉素双抗性基因。
pcr相关试剂实验结果分析:
PCR实验结果的分析涉及多个方面,包括实验操作、试剂质量、实验条件等,这些因素都会影响PCR实验的成功率和结果的准确性。以下是对PCR实验结果分析的一些关键点:
循环次数过多:增加模板量减少循环次数,缩短退火时间及延伸时间,或改用两种温度的PCR循环,可以有效避免循环次数过多导致的问题。
退火温度过低:退火温度的适当调整对于PCR反应的成功至关重要,过低的退火温度可能导致非特异性扩增,影响结果的准确性1。
电泳体系问题:包括凝胶中缓冲液和电泳缓冲液浓度相差太大、凝胶没有凝固好、琼脂糖质量差等问题,这些都会影响DNA片段的分离效果。
试剂盒问题:运输储存不当可能引起试剂盒失效,试剂盒本身质量问题如引物选择、循环参数设置不当也可能导致实验失败1。
降解的陈旧模板:使用降解的陈旧模板进行扩增容易产生涂布,影响结果的解读1。
PCR假阴性结果:可能由引物长度不够、试剂浓度不标准、靶序列突变或缺失、循环参数设置错误、标本中有Taq酶抑制剂、PCR产物检测系统灵敏度不够等因素引起。
为了获得准确的PCR实验结果,需要注意以下几点:
确保PCR反应体系中各种试剂的配比和操作步骤的精准度。
在PCR反应过程中需要对PCR产物进行实时监测,以便及时对反应条件进行调整。
防止样本的污染和交叉感染,以免影响PCR反应的准确性和可靠性。
通过上述分析,可以更好地理解和控制PCR实验中的关键因素,从而提高实验结果的准确性和可靠性。
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