产品详情
Thermolabile Uracil-DNA Glycosylase热敏UDG酶
商品属性:
货号 | 规格 | 产品名称 |
P-PR1121-1000U | 1000U | Thermolabile Uracil-DNA Glycosylase热敏UDG酶 |
产品介绍:
储存条件:-20℃。
产品简介:
热敏UDG酶(Thermolabile Uracil-DNA Glycosylase)通过切割尿嘧啶碱基与糖骨架之间的 N-糖苷键,从含 dU的DNA 中去除尿嘧啶。该切割生成敏感的无嘧啶位点,在高温和碱性条件下,脱碱基位点易发生水解,导致DNA链断裂成小片段。该酶对RNA和不含有尿嘧啶的DNA无作用。热敏UDG对热敏感,50℃以上的温度下可迅速完全失活。通过在核酸扩增预混液中添加热敏UDG酶,能够有效消除扩增产物的片段污染,防止核酸扩增(PCR、qPCR、RT-PCR、RT-qPCR和LAMP等等)假阳性。
来源:基因工程大肠杆菌表达的热敏UDG重组酶。
活性单位:一个单位的尿嘧啶DNA糖基化酶定义为在37℃下60分钟内完全降解1μg纯化的单链尿嘧啶DNA所需的酶量。
质量控制:SDS-PAGE 检测纯度大于99%,经检测无核酸外切酶、核酸内切酶和核糖核酸酶活性,无细菌基因组DNA残留。
应用范围:
1.核酸扩增实验中扩增产物污染的预防与清除。
2.DNA中去除尿嘧啶碱基
10×Taq Buffer :100 mM Tris-HCl,500 mM KCl,20 mM MgCl2,pH 8.8 @ 25°C)
储存缓冲液:
10 mM Tris-HCl,50 mM NaCl,1 mM DTT,0.1 mM EDTA,50% Glycerol, pH 7.5 @ 25°C
pcr相关试剂实验结果分析:
PCR实验结果的分析涉及多个方面,包括实验操作、试剂质量、实验条件等,这些因素都会影响PCR实验的成功率和结果的准确性。以下是对PCR实验结果分析的一些关键点:
循环次数过多:增加模板量减少循环次数,缩短退火时间及延伸时间,或改用两种温度的PCR循环,可以有效避免循环次数过多导致的问题。
退火温度过低:退火温度的适当调整对于PCR反应的成功至关重要,过低的退火温度可能导致非特异性扩增,影响结果的准确性1。
电泳体系问题:包括凝胶中缓冲液和电泳缓冲液浓度相差太大、凝胶没有凝固好、琼脂糖质量差等问题,这些都会影响DNA片段的分离效果。
试剂盒问题:运输储存不当可能引起试剂盒失效,试剂盒本身质量问题如引物选择、循环参数设置不当也可能导致实验失败1。
降解的陈旧模板:使用降解的陈旧模板进行扩增容易产生涂布,影响结果的解读1。
PCR假阴性结果:可能由引物长度不够、试剂浓度不标准、靶序列突变或缺失、循环参数设置错误、标本中有Taq酶抑制剂、PCR产物检测系统灵敏度不够等因素引起。
为了获得准确的PCR实验结果,需要注意以下几点:
确保PCR反应体系中各种试剂的配比和操作步骤的精准度。
在PCR反应过程中需要对PCR产物进行实时监测,以便及时对反应条件进行调整。
防止样本的污染和交叉感染,以免影响PCR反应的准确性和可靠性。
通过上述分析,可以更好地理解和控制PCR实验中的关键因素,从而提高实验结果的准确性和可靠性。
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