产品详情
Exonuclease T
商品属性:
货号 | 规格 | 产品名称 |
P-PR1360-250U | 250U | Exonuclease T |
P-PR1360-2500U | 2500U | Exonuclease T |
产品介绍:
描述:
核酸外切酶 T(Exo T),又称为 RNase T,是一种单链 RNA 或 DNA 特异性核酸酶,该酶需要游离的3′ 末端,以 3′-5′ 方向去除核苷酸。核酸外切酶 T 可用于将含有 3′ 突出末端的 RNA 或 DNA 生成平末端。
本产品是通过重组表达 Exonuclease T 基因而得的高纯度蛋白,无核酸内切酶和其他外切酶的污染。
活性定义:在 100 μl 反应体系中,25℃ 条件下,30 分钟内能从 1 nmol [3H]-标记的聚胸腺嘧啶核苷催化产生0.1 nmol 的可溶于TCA的 DNA 所需要的酶量定义为一个活性单位。
1X Exonuclease T Buffer
50mM KAc,20mM Tris-Ac,10mM Mg(Ac)2,1mM DTT(pH 7.9)
热失活:65°C,20min。
酶储存液:
10 mM Tris-HCl, 50 mM KCl, 1 mM DTT, 0.1mM EDTA, 50% Glycerol, 200 μg/ml BSA, pH 7.5。
储存:置于-20°C 可保存 2 年,避免反复冻融。
注意事项:
核酸外切酶 T 对 RNA 和 DNA 具有不同的活性。对于RNA,在标准反应条件下,通过凝胶电泳检测,1 单位核酸外切酶 T 可以完全消化 1.0 pmol 的 rA20。
pcr相关试剂实验结果分析:
PCR实验结果的分析涉及多个方面,包括实验操作、试剂质量、实验条件等,这些因素都会影响PCR实验的成功率和结果的准确性。以下是对PCR实验结果分析的一些关键点:
循环次数过多:增加模板量减少循环次数,缩短退火时间及延伸时间,或改用两种温度的PCR循环,可以有效避免循环次数过多导致的问题。
退火温度过低:退火温度的适当调整对于PCR反应的成功至关重要,过低的退火温度可能导致非特异性扩增,影响结果的准确性1。
电泳体系问题:包括凝胶中缓冲液和电泳缓冲液浓度相差太大、凝胶没有凝固好、琼脂糖质量差等问题,这些都会影响DNA片段的分离效果。
试剂盒问题:运输储存不当可能引起试剂盒失效,试剂盒本身质量问题如引物选择、循环参数设置不当也可能导致实验失败1。
降解的陈旧模板:使用降解的陈旧模板进行扩增容易产生涂布,影响结果的解读1。
PCR假阴性结果:可能由引物长度不够、试剂浓度不标准、靶序列突变或缺失、循环参数设置错误、标本中有Taq酶抑制剂、PCR产物检测系统灵敏度不够等因素引起。
为了获得准确的PCR实验结果,需要注意以下几点:
确保PCR反应体系中各种试剂的配比和操作步骤的精准度。
在PCR反应过程中需要对PCR产物进行实时监测,以便及时对反应条件进行调整。
防止样本的污染和交叉感染,以免影响PCR反应的准确性和可靠性。
通过上述分析,可以更好地理解和控制PCR实验中的关键因素,从而提高实验结果的准确性和可靠性。
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