产品详情
加A聚合酶(E.coli)
商品属性:
货号 | 规格 | 产品名称 |
P-PR1297-100U | 100U | 加A聚合酶(E.coli) |
P-PR1297-1000U | 1000U | 加A聚合酶(E.coli) |
产品介绍:
描述:
本 E. coli Poly(A) Polymerase 为高效加 A 聚合酶,该酶以RNA为模板在RNA的3′末端加入20~200个A碱基。可应用于增强 mRNA 的稳定性,及 microRNA 加 A 尾,为cDNA 合成提供 oligo-dT 引物结合位点等。该酶以单链 RNA作为引物,ATP 作为底物进行聚合反应。
活性定义:
在 37℃、pH7.9 的条件下,以 ATP 为底物,10 分钟内把1 nmol 的 AMP 聚合到 RNA 上所需要的酶量定义为 1 个活性单位(U)。
应用:
RNA 3' 标记
microRNA 加 A 尾,为 cDNA 合成提供 oligo-dT 引物结合位点
增强 RNA 稳定性
储存:-20°C 可保存 2 年。
热失活条件:65°C 20 min
pcr相关试剂实验结果分析:
PCR实验结果的分析涉及多个方面,包括实验操作、试剂质量、实验条件等,这些因素都会影响PCR实验的成功率和结果的准确性。以下是对PCR实验结果分析的一些关键点:
循环次数过多:增加模板量减少循环次数,缩短退火时间及延伸时间,或改用两种温度的PCR循环,可以有效避免循环次数过多导致的问题。
退火温度过低:退火温度的适当调整对于PCR反应的成功至关重要,过低的退火温度可能导致非特异性扩增,影响结果的准确性1。
电泳体系问题:包括凝胶中缓冲液和电泳缓冲液浓度相差太大、凝胶没有凝固好、琼脂糖质量差等问题,这些都会影响DNA片段的分离效果。
试剂盒问题:运输储存不当可能引起试剂盒失效,试剂盒本身质量问题如引物选择、循环参数设置不当也可能导致实验失败1。
降解的陈旧模板:使用降解的陈旧模板进行扩增容易产生涂布,影响结果的解读1。
PCR假阴性结果:可能由引物长度不够、试剂浓度不标准、靶序列突变或缺失、循环参数设置错误、标本中有Taq酶抑制剂、PCR产物检测系统灵敏度不够等因素引起。
为了获得准确的PCR实验结果,需要注意以下几点:
确保PCR反应体系中各种试剂的配比和操作步骤的精准度。
在PCR反应过程中需要对PCR产物进行实时监测,以便及时对反应条件进行调整。
防止样本的污染和交叉感染,以免影响PCR反应的准确性和可靠性。
通过上述分析,可以更好地理解和控制PCR实验中的关键因素,从而提高实验结果的准确性和可靠性。
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