产品详情
Green qPCR MasterMix(High ROX) 高ROX校正qPCR荧光定量Mix-染料法
商品属性:
货号 | 规格 | 产品名称 |
P-PR1137-1 ml | 1 ml | Green qPCR MasterMix(High ROX) 高ROX校正qPCR荧光定量Mix-染料法 |
P-PR1137-1ml×5 | 1ml×5 | Green qPCR MasterMix(High ROX) 高ROX校正qPCR荧光定量Mix-染料法 |
P-PR1137-1ml×15 | 1ml×15 | Green qPCR MasterMix(High ROX) 高ROX校正qPCR荧光定量Mix-染料法 |
产品介绍:
存储条件:-20℃避光保存。如需频繁使用,可存放于2-8℃,避免反复冻融。
制品说明:
Green qPCR MasterMix(High ROX)是专用于染料法(SYBR Green I)实时荧光定量PCR的预混体系,浓度为2×,包含HotStar Taq DNA Polymerase、PCR Buffer、dNTPs、SYBR Green I 荧光染料和Mg2+和一管High ROX校正染料,操作简单方便。主要用于基因组DNA靶序列和RNA反转录后cDNA靶序列的检测。本品所含的荧光染料SYBR Green I可以与所有的双链DNA结合,使该产品可用于不同靶序列的检测而不需合成特异性标记探针。
本品含有的HotStar Taq DNA Polymerase是一种经抗体修饰的、全新高效热启动酶,在常温下没有聚合酶活性,有效避免在常温条件下由引物和模板非特异性结合或引物二聚体而产生的非特异性扩增,酶的激活须在95℃下孵育2分钟。独特的PCR缓冲体系与热启动酶的组合,有效抑制了非特异性的PCR扩增,显著提高了PCR的扩增效率。
所含的ROX染料可校正定量PCR仪孔与孔之间产生的荧光信号误差,本试剂盒中ROX校正染料含量较高,适用于ABI Prism7000/7300/7700/7900,Eppendorf,ABIStep One/Step One Plus等需要较高ROX信号进行校正的荧光定量PCR仪。
产品特点:
1.本产品中使用了全新高效热启动酶HotStar Taq DNA Polymerase与独特的PCR缓冲体系,显著提高PCR的扩增效率,具有高灵敏度和特异性强的特点;
2.适用于荧光定量 PCR 检测,能够准确地对目的基因进行定量和检测。
注意事项:
1.使用前请上下颠倒轻轻混匀,尽量避免起泡,并经短暂离心后使用;
2.本产品中含有 SYBR Green I 荧光染料和ROX 染料,保存本产品或配制PCR 反应液时应避免强光照射;
3.避免反复冻融本品,反复冻融可能使产品性能下降。
4.本品不能用于探针法荧光定量 PCR。
5.配制反应液时,请使用新的或者无污染的枪头和离心管,尽量防止污染。
pcr相关试剂实验结果分析:
PCR实验结果的分析涉及多个方面,包括实验操作、试剂质量、实验条件等,这些因素都会影响PCR实验的成功率和结果的准确性。以下是对PCR实验结果分析的一些关键点:
循环次数过多:增加模板量减少循环次数,缩短退火时间及延伸时间,或改用两种温度的PCR循环,可以有效避免循环次数过多导致的问题。
退火温度过低:退火温度的适当调整对于PCR反应的成功至关重要,过低的退火温度可能导致非特异性扩增,影响结果的准确性1。
电泳体系问题:包括凝胶中缓冲液和电泳缓冲液浓度相差太大、凝胶没有凝固好、琼脂糖质量差等问题,这些都会影响DNA片段的分离效果。
试剂盒问题:运输储存不当可能引起试剂盒失效,试剂盒本身质量问题如引物选择、循环参数设置不当也可能导致实验失败1。
降解的陈旧模板:使用降解的陈旧模板进行扩增容易产生涂布,影响结果的解读1。
PCR假阴性结果:可能由引物长度不够、试剂浓度不标准、靶序列突变或缺失、循环参数设置错误、标本中有Taq酶抑制剂、PCR产物检测系统灵敏度不够等因素引起。
为了获得准确的PCR实验结果,需要注意以下几点:
确保PCR反应体系中各种试剂的配比和操作步骤的精准度。
在PCR反应过程中需要对PCR产物进行实时监测,以便及时对反应条件进行调整。
防止样本的污染和交叉感染,以免影响PCR反应的准确性和可靠性。
通过上述分析,可以更好地理解和控制PCR实验中的关键因素,从而提高实验结果的准确性和可靠性。
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