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上海雅吉生物科技有限公司
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产品详情

本产品只能用于科研,更多产品详细信息可免费向客服索取

产品名称:布氏罗得西亚锥虫PCR试剂盒

本产品就是根据PCR原理专门开发的试剂盒,它具有下列特点:

1. 即开即用,用户只需要提供样品DNA模板。

2. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。

3. 产品精心优化且特异性高,引物是根据高度保守区设计,不会跟除此之外的其它微生物DNA发生交叉反应。

4. PCR mix中含上样染料,PCR后可以直接上样电泳。

5. 本产品足够50次20μL体系的PCR反应。

6. 本产品只能用于定性实验,不能用于定量。

7. 本产品只能用于科研


布氏罗得西亚锥虫PCR试剂盒使用方法

一、稀释 PCR 阳性对照(以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例)

1. 注意:由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作为阳性对照。

2. 标记 6 个离心管,分别为 7,6,5,4,3,2。

3. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 专用模板稀释液(用带芯枪头,下同)。

4. 在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照,充分震荡 1 分钟,得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。

5. 换枪头,在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。

6. 换枪头,在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。

7. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。

流感通用.png

二、DNA提取:

可采用PCR试剂盒配备的DNA抽提液,按以下说明进行DNA核酸的粗提。

1、液体培养物:取液体培养物100μL加到1.5mL无菌离心管中,8000rpm离心3min,尽量吸弃上清,加入50μL DNA抽提液充分混匀,100℃恒温10min,13000rpm离心3min,取上清5μL进行PCR反应。

2、固体培养物:挑取单克隆菌落与50μL DNA抽提液充分混匀,100℃恒温10min,13000rpm离心3min,取上清5μL进行PCR反应。

3、粪便样品:挑取米粒大小粪便于灭菌离心管中,加入0.5mL生理盐水,振荡混匀,13000rpm离心3分钟,弃上清,沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混匀,100℃恒温10min,13000rpm离心3min取上清5μL进行PCR反应。

4、其他液体标本:取标本2-3mL,13000rpm离心3min,弃上清,沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混匀,100℃恒温10min,13000rpm离心3min取上清5μL进行PCR反应。

盖上盖子后上机,按下面参数进行 PCR:

 过程

 温度

 时间

 预变性

 95℃

 5 分

 PCR反应(35个循环)

  95℃

10 秒

 60℃

 40 秒(采集 SYBR 通道的荧光信号)


 溶解曲线分析


 按 qPCR 仪器手册执行

注意:循环次数不要超过 35 个循环。


布氏罗得西亚锥虫PCR试剂盒样本采集、存放及运输:

1、样本采集:各类型样本按照常规方法采集;

2、运输及保存:低温运输,-20v℃保存,保存期限一年。阳性对照需单独放置,不要污染其他试剂。

3、运输:采用泡沫箱加冰密封进行运输。

4、自备试剂:样品DNA。


布氏罗得西亚锥虫PCR试剂盒相关产品如下

Trypanosoma evansi伊氏锥虫PCR试剂盒136607050次
Trypanosoma equiperdum马媾疫锥虫PCR试剂盒136606050次
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Trypanosoma brucei brucei布氏布氏锥虫PCR试剂盒136601050次
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Mannheimia spp.曼氏杆菌PCR试剂盒PCR试剂盒136490050次
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Dengue Virus(DENV)登革病毒3型RT-PCR试剂盒136483050次
Dengue Virus(DENV)登革病毒2型RT-PCR试剂盒136482050次
Dengue Virus(DENV)登革病毒1型RT-PCR试剂盒136481050次
Dengue Virus(DENV)登革病毒RT-PCR试剂盒136480050次
ESBL-Klebsiella pneumoniae超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌PCR试剂盒136470050次
Haemophilus agni阿古尼嗜血杆菌PCR试剂盒136460050次
Crossiella equi马克洛菌PCR试剂盒136450050次
Infectious Bronchitis Virus(IBV)传染性支气管炎病毒RT-PCR试剂盒136440050次
Listeria monocytogenes单核细胞增生李斯特菌PCR试剂盒136432050次
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Enterotoxigenic E.coli(ETEC)产肠毒素性大肠杆菌(大肠埃希氏菌)PCR试剂盒136370050次
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