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上海抚生实业有限公司
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大鼠肝内胆管上皮细胞

细胞原代培养原理和应用:
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细胞原代培养是通过特殊分离方法从胚胎、组织器官以及外周血中分离获得单细胞,置于合适的培养基中培养,在无菌、适当温度和一定条件下,使细胞生存、生长和繁殖的过程。原代培养的“代”并非细胞的代数,是指细胞培养的次数,从体内取出组织接种培养到第一次传代的阶段,都属原代培养,一般持续1-4周。
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大鼠肝内胆管上皮细胞原代培养细胞直接来源于活体组织,体外培养也尽量模拟体内环境,使得分离得到的细胞接近生物体内的生活状态,可作为研究生物体细胞的生产、代谢、繁殖、凋亡提供有力手段,亦可用于各种药理作用、药物开发研究和临床实践。

原代细胞的质量取决于多个因素:取材、培养条件的优化、无菌操作,特别是组织分离技术等。对于大多数研究者而言,想要获得高质量的原代培养细胞仍然比较困难。尽管原代培养技术已较普遍,但是有时仍会得到一些难以解释的结果。公司拥有行政许可的洁净级实验动物中心,已构建细胞培养和实验平台,可分离培养数百种人、大小鼠和大型动物的原代细胞,并在此基础上提供相关细胞实验服务,包括细胞培养、细胞转染以及细胞药物刺激后各种增殖、侵染和凋亡实验。如果在细胞实验上有任何困难,即可联系我们,我们很乐意提供帮助。

细胞简介:

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大鼠肝内胆管上皮细胞分离自肝脏组织;肝脏是身体内以代谢功能为主的一个器官,并在身体里面起着去氧化、储存肝糖、分泌性蛋白质的合成等作用;肝脏也制造消化系统中之胆汁。肝脏是机体内脏里最大的器官,位于机体中的腹部位置,在右侧横隔膜之下,位于胆囊之前端且于右边肾脏的前方,胃的上方。肝脏是机体消化系统中最大的消化腺,为一红棕色的V字形器官。肝脏是尿素合成的主要器官,又是新陈代谢的重要器官。肝脏在机体位置和形态结构:肝脏位于右上腹,隐藏在右侧膈下和肋骨深面,大部分肝为肋弓所复盖,仅在腹上区、右肋弓间露出并直接接触腹前壁,肝上面则与膈及腹前壁相接。通过控制激素调控的分泌和吸收,在保持、调整和扩大胆小管的结构中发挥重要作用,肝内胆管上皮细胞在先天性和获得性免疫应答方面起着积极作用。肝内胆管上皮细胞约占肝细胞总数的5%,其在肝内胆道系统内形成复杂的网状管形结构。肝内胆管上皮细胞具有复杂的生理代谢功能,参与肝脏的代谢、排泌、免疫等生理过程,在肝脏疾病的发生发展过程中起一定的作用。研究表明,常见的肝内胆管病变例如原发性硬化性胆管炎、胆管癌等疾病,都是以肝内胆管上皮细胞为病变靶位,进而引起肝内胆管上皮损伤。因此,了解正常肝内胆管上皮细胞的生物学特征和病变肝内胆管上皮细胞的病理特征对研究肝内胆管病变的发病机制、诊断和治疗具有重要意义。


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商品属性:
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产品名称

大鼠肝内胆管上皮细胞

组织来源

肝脏组织

产品规格

5×105cells/T25细胞培养瓶

生长特性

贴壁

细胞形态

上皮细胞样

用途

仅供科研研究实验

方法简介:

公司实验室分离的大鼠肝内胆管上皮细胞采用胶原酶灌注消化法后,再用胶原酶-DNA酶联合消化,接种至预先包被鼠尾胶原的培养瓶中,通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:

公司实验室分离的大鼠肝内胆管上皮细胞经Cytokeratin-19免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

 

培养信息:

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包被条件 鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2)

培养基 FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 上皮细胞样

传代特性 可传1-2代

消化液 0.25%胰蛋白酶

培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%

注意事项:

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① 细胞培养、传代以及冻存需要严格的无菌操作。

② 传代时需要适度的消化,消化的时间受消化液的种类、配制时间、加入培养瓶中的量等诸多因素的影响,消化过程中应该注意培养细胞形态的变化,一旦胞质回缩,连接变松散,或有成片浮起的迹象就要立即终止消化。

③ 传代应在细胞处于对数期、未达到汇合状态时进行。

④ 细胞冻存液需提前配制,不可直接将DMSO加入细胞悬液中。

⑤ 应选择汇合度80%-90%左右,并且活力达90%以上处于对数生长期时的细胞进行冻存操作,确保细胞冻存时状态最佳,冻存密度可根据细胞特性进行调整。

⑥ 程序冻存盒、细胞冻存液、完全培养基等试剂都要复温至室温备用。

⑦ 冻存前注意切勿消化时间过长、吹打力度过重、离心转速过大或离心时间过长,以免造成细胞损伤。

⑧ 冻存管的盖子一定要拧紧,否则水浴复苏时水会渗入造成污染。

⑨ 细胞不可长期保存在-80℃冰箱中,放置时间不要超过3天。

⑩ 液氮或冰箱距离细胞房较远,细胞需要放在干冰或冰盒上运送至细胞房。

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