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大鼠肾小管上皮细胞
细胞简介:
大鼠肾小管上皮细胞分离自肾组织;肾脏是机体的重要器官,它的基本功能是生成尿液,借以清除体内代谢产物及某些废物、毒物,同时经重吸收功能保留水份及其他有用物质,如葡萄糖、蛋白质、氨基酸、钠离子、钾离子、碳酸氢钠等,以调节水、电解质平衡及维护酸碱平衡。肾脏同时还有内分泌功能,生成肾素、促红细胞生成素、活性维生素D3、前列腺素、激肽等,又为机体部分内分泌激素的降解场所和肾外激素的靶器官。肾脏的这些功能,保证了机体内环境的稳定,使新陈代谢得以正常进行。肾小管是机体肾脏器官上与肾小囊壁层相连的一条细长上皮性小管,具有重吸收(reabsorption)和排泌作用。肾小管按不同的形态结构、分布位置和功能分成近端小管、髓袢和远端小管三部分;近端小管可分为直部和曲部,曲部也称为近曲小管,位于皮质迷路内,于肾小体附近高度蟠曲;远端小管曲部也称为远曲小管,位于皮质迷路内。肾小管上皮细胞是肾小管外面的一层细胞,肾小管上皮细胞的分离、培养是研究肾脏疾病的一项重要技术,目前该细胞分离方法有酶分离法、化学分离法筛网分离法、显微解剖分离法、流式细胞仪分离法等。肾小管上皮细胞主要功能:①肾小管上皮细胞重吸收原尿中几乎全部的葡萄糖和氨基酸;②排泌非营养物质进入终尿;③细胞能分泌炎症介质如细胞因子和趋化因子,通过产生IL-8或直接趋化白细胞参与急性炎症反应;④移植肾炎症和新月体肾炎中PTEpiC表达IL-2R和MHC-Ⅱ类抗原,这说明肾小管上皮细胞参与肾免疫损伤的发生。随着对肾间质纤维化机制研究的日渐加深,肾小管上皮细胞(RTECs)在其中的作用日益被人们重视。因此,提供良好的肾小管上皮细胞模型,在肾小管间质疾病的发病机制和治疗药物筛选的研究中是非常重要的。
方法简介:
公司实验室分离的大鼠肾小管上皮细胞采用先机械研磨过不锈钢网筛分离得到肾小管、后用胶原酶消化,结合上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的大鼠肾小管上皮细胞经Cytokeratin-18免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
商品属性:
产品名称 | 大鼠肾小管上皮细胞 | 组织来源 | 肾组织 |
产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 产品货号 | A01X1587 |
包装 | 瓶装 | 用途 | 仅供科研研究实验 |
培养信息:
包被条件 鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 上皮细胞样
传代特性 可传1-2代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
注意事项:
1)原代培养的分离细胞在初次接触体外环境时,虽然被分散成单个细胞,但它们之间的互相影响还是存在的, 而且这种影响对细胞能否存活是非常重要的。在这些细胞之间能产生一些促生长的活性物质, 使细胞彼此互相促进存活和生长。如果接种的细胞密度过低, 细胞之间的促生长作用很小, 虽然营养物质很充足, 也很难使细胞适应从体内的组织环境到被分散后进入独立生存环境的变化过程。 如果接种的细胞密度过大,会导致营养物质供应不足, 代谢废物积累较快需要经常换液和传代。
2)原代培养时初始培养在组织分散和分离细胞时细胞可能会受到严重的损伤。适当增大原代培养接种的细胞密度, 给培养的细胞提供更多的类似于在体内时细胞之间的相互作用, 会极大提高原代培养的细胞在体外存活率。待细胞适应体外环境后进行传代培养时再以较低的密度接种和培养。
3)由于细胞之间的相互的内在联系被打破,分离细胞在体外培养时经历的生存环境改变很大,在体外存活和生长的难度相应增加。 对于贴壁依赖性细胞来说,尽快使接种的细胞贴壁,是决定培养能否成功的关键。可以在接种后先将培养瓶置培养箱内培养 3h 到 5h,由于细胞悬液中带有少量培养液, 细胞即可以维持存活, 又可以很快接触到培养瓶底壁, 是细胞迅速黏附于底物,待细胞贴壁后,再补足培养液继续培养。
4)分离细胞培养法—悬浮型细胞培养。
公司正在出售的产品:
柠檬(CA)含量活性比色法检测试剂盒 | 人皮肤成纤维细胞HSF |
肉毒碱棕榈酰转移(CPT1)活性比色法检测试剂盒 | 小鼠精原细胞系GC-1 spg(种属鉴定) |
大鼠超敏C反应蛋白(hs-CRP)ELISA检测试剂盒 | 小鼠胸腺激酶缺陷细胞LMTK(种属鉴定) |
马痘病毒PCR试剂盒 | 人卵巢癌细胞SKOV3 (STR鉴定正确) |
3号染色体开放阅读框25封闭多肽 | 大鼠肝星形细胞CFSC-8B(种属鉴定) |
19号染色体开放阅读框45封闭多肽 | 人结直肠腺癌细胞COLO 201(STR鉴定正确) |
组胺牛血清白蛋白偶联物 | 人前列腺癌细胞C4-2 (STR鉴定正确) |
1号染色体开放阅读框103封闭多肽 | 小鼠肝细胞AML12(种属鉴定) |
微管蛋白γ封闭多肽 | 小鼠皮下结缔组织细胞A9(种属鉴定) |
重组原C蛋白 | 大鼠垂体瘤细胞GH3(种属鉴定) |
电导钙激活钾通道蛋白1封闭多肽 | 293T [HEK-293T](人胚肾细胞) (STR鉴定正确) |
ALKB蛋白封闭多肽 | BGC-823 (人胃腺癌细胞(低分化)) (Hela污染细胞系,暂不供应) |
鸡主要组织相容性复合体(MHC/B)检测试剂盒elisa | CoC1/DDP (人卵巢癌细胞CoC1顺铂耐药亚株) (STR鉴定正确) |
人白介su1可溶性受体Ⅰ(IL-1sRⅠ)试剂盒ELISA | 大鼠肾小管上皮细胞HEC-1-B (人zi宫内膜腺癌细胞) (STR鉴定正确) |
人组蛋白H3.3(H3F3A/H3.3A/H3F3/PP781H3F3B/H3.3B)ELISA试剂盒 | HUV-EC-C [HUVEC] (人脐静脉血管内皮细胞) (STR鉴定正确) |
操作过程:
1)制备细胞悬浊液,计数并用培养液调整细胞密度。
2)在培养皿中加入足够的培养液。
3)将欲接种的细胞接种到培养器皿中。
4)在培养皿内放入一个有聚四氟乙烯包被的磁棒。将培养皿封口,送入恒温箱内。在磁力搅拌器上边搅拌边培养。若接种培养瓶或试管中,封口后可将培养器皿固定在恒温摇床上,边摇动边培养,无需放置磁棒。有些细胞也可以不用磁棒或磁力搅拌器,也不必使用恒温摇床,接种于预先用硅脂包被的培养器皿内直接在培养箱中静置培养即可。
5)培养液略呈黄色换液。吸出部分旧培养液,加入新鲜培养液即可。
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