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兔角膜上皮细胞
细胞原代培养原理和应用:
细胞原代培养是通过特殊分离方法从胚胎、组织器官以及外周血中分离获得单细胞,置于合适的培养基中培养,在无菌、适当温度和一定条件下,使细胞生存、生长和繁殖的过程。原代培养的“代”并非细胞的代数,是指细胞培养的次数,从体内取出组织接种培养到第一次传代的阶段,都属原代培养,一般持续1-4周。
兔角膜上皮细胞原代培养细胞直接来源于活体组织,体外培养也尽量模拟体内环境,使得分离得到的细胞接近生物体内的生活状态,可作为研究生物体细胞的生产、代谢、繁殖、凋亡提供有力手段,亦可用于各种药理作用、药物开发研究和临床实践。
原代细胞的质量取决于多个因素:取材、培养条件的优化、无菌操作,特别是组织分离技术等。对于大多数研究者而言,想要获得高质量的原代培养细胞仍然比较困难。尽管原代培养技术已较普遍,但是有时仍会得到一些难以解释的结果。公司拥有行政许可的洁净级实验动物中心,已构建细胞培养和实验平台,可分离培养数百种人、大小鼠和大型动物的原代细胞,并在此基础上提供相关细胞实验服务,包括细胞培养、细胞转染以及细胞药物刺激后各种增殖、侵染和凋亡实验。如果在细胞实验上有任何困难,即可联系我们,我们很乐意提供帮助。
细胞简介:
兔角膜上皮细胞分离自眼角膜组织;角膜位于眼球前壁的一层透明膜,约占纤维膜的前1/6,从后面看角膜呈正圆形,从前面看为横椭圆形。角膜厚度各部分不尽相同,中央部最薄。角膜有十分敏感的神经末梢,如有外物接触角膜,眼睑便会不由自主地合上以保护眼睛。为了保持透明,角膜并没有血管,透过外界空气、泪液及房水获取养份及氧气。角膜分为五层,由前向后依次为:上皮细胞层、前弹力层、基质层、后弹力层、内皮细胞层。其主要功能如下:①角膜是唯一的无血管的组织,具有透明的特性和合成许多蛋白的功能,分三层细胞层,外层即是上皮细胞;②角膜上皮细胞能参与先天性免疫,能感应病原体存在并发出信号从而激活角膜防御系统;③角膜上皮细胞能高效表达醛脱氢酶。角膜上皮细胞的体外培养对研究角膜的生理学、病理学、免疫学以及分子生物学都是极为重要的手段,常用于研究细胞代谢产物、病毒感染、各种生长因子和药物对细胞生长的影响。
商品属性:
产品名称 | 兔角膜上皮细胞 | 组织来源 | 角膜组织 |
产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 生长特性 | 贴壁 |
细胞形态 | 上皮细胞样 | 用途 | 仅供科研研究实验 |
方法简介:
公司实验室分离的兔角膜上皮细胞采用混合胶原酶消化结合上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的兔角膜上皮细胞经PCK免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
包被条件 鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 上皮细胞样
传代特性 可传1-3代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
注意事项:
① 细胞培养、传代以及冻存需要严格的无菌操作。
② 传代时需要适度的消化,消化的时间受消化液的种类、配制时间、加入培养瓶中的量等诸多因素的影响,消化过程中应该注意培养细胞形态的变化,一旦胞质回缩,连接变松散,或有成片浮起的迹象就要立即终止消化。
③ 传代应在细胞处于对数期、未达到汇合状态时进行。
④ 细胞冻存液需提前配制,不可直接将DMSO加入细胞悬液中。
⑤ 应选择汇合度80%-90%左右,并且活力达90%以上处于对数生长期时的细胞进行冻存操作,确保细胞冻存时状态最佳,冻存密度可根据细胞特性进行调整。
⑥ 程序冻存盒、细胞冻存液、完全培养基等试剂都要复温至室温备用。
⑦ 冻存前注意切勿消化时间过长、吹打力度过重、离心转速过大或离心时间过长,以免造成细胞损伤。
⑧ 冻存管的盖子一定要拧紧,否则水浴复苏时水会渗入造成污染。
⑨ 细胞不可长期保存在-80℃冰箱中,放置时间不要超过3天。
⑩ 液氮或冰箱距离细胞房较远,细胞需要放在干冰或冰盒上运送至细胞房。
公司正在出售的产品:
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重组人IL-3 (活性的, Tag free) | FTC-133人甲状腺癌细胞专用培养基 |
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γ谷氨酰半合成mei封闭多肽 | HCT116+LUC人结肠癌荧光素酶标记细胞专用培养基 |
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