原代培养原理和应用：

一、细胞原代培养是通过特殊分离方法从胚胎、组织器官以及外周血中分离获得单细胞，置于合适的培养基中培养，在无菌、适当温度和一定条件下，使细胞生存、生长和繁殖的过程。原代培养的“代”并非细胞的代数，是指细胞培养的次数，从体内取出组织接种培养到第一次传代的阶段，都属原代培养，一般持续1-4周。常见的原代培养过程如图1所示。

二、原代培养细胞直接来源于活体组织，体外培养也尽量模拟体内环境，使得分离得到的细胞接近生物体内的生活状态，可作为研究生物体细胞的生产、代谢、繁殖、凋亡提供有力手段，亦可用于各种药理作用、药物开发研究和临床实践。

三、原代细胞的质量取决于多个因素：取材、培养条件的优化、无菌操作，特别是组织分离技术等。对于大多数研究者而言，想要获得高质量的原代培养细胞仍然比较困难。尽管原代培养技术已较普遍，但是有时仍会得到一些难以解释的结果。拥有行政许可的洁净级实验动物中心，已构建细胞培养和实验平台，可分离培养数百种人、大小鼠和大型动物的原代细胞，并在此基础上提供相关细胞实验服务，包括细胞培养、细胞转染以及细胞药物刺激后各种增殖、侵染和凋亡实验。

兔视网膜前体细胞

培养信息：

培养基：含B-27 Supplement、EGF、bFGF、Penicillin、Streptomycin等

换液频率：每2-3天换液一次

生长特性：半贴壁半悬浮

细胞形态：圆形

传代特性：可传1-2代

消化液：0.25%胰蛋白酶

培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%

兔视网膜前体细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。

方法简介：

实验室分离的兔视网膜前体细胞采用胰蛋白酶消化法结合专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测：

实验室分离的兔视网膜前体细胞经Nestin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

细胞简介：

兔视网膜前体细胞分离自视网膜组织；视网膜居于眼球壁的内层，是一层透明的薄膜。视网膜由色素上皮层和视网膜感觉层组成，两层间在病理情况下可分开，称为视网膜脱离。色素上皮层与脉络膜紧密相连，由色素上皮细胞组成，它们具有支持和营养光感受器细胞、遮光、散热以及再生和修复等作用。组织学上视网膜分为10层，由外向内分别为：色素上皮层、视锥、视杆细胞层、外界膜、外颗粒层、外丛状层、内颗粒层、内丛状层、神经节细胞层、神经纤维层、内界膜。视网膜内层为衬于血管膜内面的一层薄膜，有感光作用；后部鼻侧有一视神经乳头。视网膜上的感觉层是由三个神经元组成。第一神经元是视细胞层，专司感光，它包括锥细胞和杆细胞。视杆细胞主要在离中心凹较远的视网膜上，而视锥细胞则在中心凹处最多。第二层叫双节细胞，约有10到数百个视细胞通过双节细胞与一个神经节细胞相联系，负责联络作用。第三层叫节细胞层，专管传导。视网膜是一层菲薄的但又非常复杂的结构，它贴于眼球的后壁部，传递来自视网膜感受器冲动的神经纤维跨越视网膜表面，经由视神经到达出口。视网膜的分辨力是不均匀的，在黄斑区，其分辨能力最强。

贴壁细胞传代操作步骤：

用移液管或者巴氏吸管吸取培养液；

使用不含钙镁离子的平衡盐溶液（PBS）冲洗细胞1-2次；

弃PBS，加入胰蛋白酶-EDTA消化液（消化液浓度根据各细胞不同有调整），轻轻摇晃培养瓶，使胰酶与细胞表面充分接触，37 ℃孵育2-3 min，加入含血清完全培养基终止消化。

将细胞悬液移入离心管中，800 rpm-1000rpm离心5min，弃上清，加入预热的完全培养基重悬细胞，轻轻吸打混匀，吹打过程中尽量不要出现气泡。

细胞计数，根据细胞量选择合适的传代比例，最后转移置37 ℃细胞培养箱中进行培养。

 悬浮细胞传代操作步骤：

悬浮细胞由于本身在生长培养基中悬浮，无需通过酶的作用使其从培养容器表面脱离，整个过程较为迅速，对细胞损伤较小。悬浮细胞传代，通常有两种方法，直接传代法和离心传代法。

（1）直接传代法

①　悬浮细胞长满至80%-90%左右（细胞悬液变黄，最大细胞密度随细胞系不同而有所差异），即可传代；

②　用吸管吸弃细胞悬液1/2～2/3；

③　加入适量的新鲜培养基，继续培养。

（2）离心传代法

①　将细胞悬液转移到离心管内；

②　800 rpm-1000rpm离心5min，弃上清；

③　使用新鲜的培养基重悬细胞；

④　吸管吸取适量细胞悬液，装入新的培养瓶，再加入适量的新鲜培养基，继续培养。

公司正在出售的产品：

Octaarginine  148796-86-5  C48H98N32O9

Octadecylphosphophosphoniumcholine  156825-89-7  C23H50O4P2

Octreotide trifluoroacetate salt (Dimer, Antiparallel)  1926163-78-1  C98H132N20O20S4

Octreotide trifluoroacetate salt (Dimer, Parallel)  1926163-80-5  C98H↶恰û

n-Octyltetraoxyethylene  19327-39-0  C16H34O5

n-Octyltrioxyethylene  19327-38-9  C14H30O4

N-β-Aminoethyl-Gly-OEt . 2 HCl  24123-04-4  C6H14N2O2 · 2HCl

N-β-Aminoethyl-Gly-OH  24123-14-6  C4H10N2O2

N-ω-Hydroxy-L-norarginine  189302-40-7  C5H12N4O3

N-Me-Tyr-OMe . HCl  70963-39-2  C11H15NO3 · HCl

N-Me-Val-Leu-anilide  194351-54-7  C18H29N3O2

N-Me-Val-OBzl . p-tosylate  42492-62-6  C13H19NO2 · C7H8O3S

N-Me-Val-OMe . HCl  3339-44-4  C7H15NO2 · HCl

n-Octylpentaoxyethylene  19327-40-3  C18H38O6

小鼠循环免疫复合物(CIC)ELISA试剂盒 ，英文名： CIC ELISA Kit

小鼠同型半胱氨酸(Hcy)ELISA检测试剂盒MouseHomocysteicacid,HcyELISAKit 96T/48T

人激肽释放酶6(KLK 6)免疫试剂盒 Human Kallikrein 6,KLK 6 ELISA Kit

Ratbrain-gpeptides,BGP/GehrelinELISAKit大鼠脑肠肽(BGP/Gehrelin)ELISA试剂盒规格：96T/48T

10%Brij-35100毫升

MouseBonemorphogeneticproteieceptorⅡ,BMPR-ⅡELISA试剂盒小鼠骨成型蛋白受体Ⅱ(BMPR-Ⅱ)ELISA试剂盒规格：96T/48T

兔视网膜前体细胞小鼠Sesin小鼠3蛋白(SESN3)ELISA试剂盒 ，英文名： SESN3 ELISA Kit

人凝血酶受体()ELISA检测试剂盒Humahrombieceptor,ELISAKit 96T/48T

大鼠花生四烯酸(AA)免疫试剂盒 Rat Arachidonic Acid,AA ELISA Kit

英文名称RatSerotonin5-HydroxyyptamineELISAKit大鼠5-羟色氨(5-HT)规格：96T/48T

裂解液Ⅹ真菌/酵母细胞活性化蛋白制备

ELISAKitMAdCAM-1人黏膜地址素细胞黏附分子规格：48T/96T

小鼠游离状腺原酸(Free-T3)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

Human ai histone aibody of ai -DNA (H2A-H2B) / two mer -DNA aibody ELISA Kit 人抗组蛋白(H2A-H2B)-DNA抗体/抗二聚体-DNA抗体ELISA试剂盒

Humanepithelialspecificaigen,ESAELISAKit 人上皮特异性抗原(ESA)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitfor8-iso-PG(Human8-isoprostaglandin)ELISAKit人8异前列腺素规格：48T/96T

异丁甲基细胞脂肪诱导生成比色法定量检测试剂盒20次

MouseMotilin,MTLELISAKit小鼠胃动素(MTL)ELISA试剂盒规格：96T/48T