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Livecyte-定量非标记活细胞成像及分析系统
Livecyte是一种独特的活细胞分析系统，它使用QPI技术实现动态细胞分析，在几个小时或几天内自动跟踪和分析个体细胞和细胞群体的形态和行为变化。 Livecyte使用称为Ptychography的成像技术。该系统能产生高对比度，高保真度的图像，这些图像是无伪影和可定量的，并且该成像技术无需细胞标记或高强度光学成像（high intensity lightimaging）。
优点：
分辨率高，无伪影
真正的长时间活细胞非标记成像，可观察数小时到数月
可自动追踪细胞，省去大量人力，同时避免人为造成的误差
快速自动对焦，捕获高清图像
强大分析软件，自动多参数定量分析
650nm的激发光，光毒性小，对干细胞和原代细胞具有特别的优势
不依赖于物镜的大FOV（高达2.5 x 2.5mm）可确保高运动的细胞在长时间的追踪过程中不会“丢失”
实时监控，自动生成Movie,可改变传统的“终点法”实验方法
高通量，可以同时检测96孔板
配有活细胞工作站，自动控制温度，湿度以及CO2浓度
可加3-7个荧光通道
非标记成像可与荧光成像共定位
图1.Ptychography成像原理示意图
图 1. 在Ptychography中，样本和照射激光相对于彼此移动从而在样本上产生重叠的照明区域，这些重叠的区域形成有序的阵列。对于每一个这样的区域，当光通过样本时，散射的光被作为衍射图案被sCMOS相机捕获。然后使用专有算法处理衍射图案以重建定量相位图像。扫描技术使得能够产生非常大的视野，这在对高度移动的细胞进行踪测定中是非常有价值的。
◆ 应用方向 ◆
·细胞计数（cell counting） ·细胞迁移（cell Migration）
·细胞毒理实验（Cytotoxicity test） ·细胞免疫疗法实验（Cell immunotherapy experiments）
·血管生成分析(Angiogenesis） ·细胞周期（Cell Cycle）
·细胞健康状况（Cell Health） ·高通量细胞增殖检测（Cell Proliferation HT）
·核计数（Count Nuclei） ·神经生长（Neurite Outgrowth）
·有丝分裂指数（Mitotic Index）
◆ 应用举例 ◆
1.细胞迁移
多参数描述细胞的行为（Media2与下图放在一起）
2.追踪有丝分裂过程 Media20
3.监测血管形成 Media19
4.检测细胞凋亡 Media22
细胞迁移详细分析;
显示了分别用载体（vehicle）处理MDA-MB-231细胞作为对照组，50μM溶血磷脂酸（LPA）处理过的MDA-MB-231细胞作为实验组。分别选取开始处理到48小时处理结束后的图像与对照组相比，用LPA处理的细胞在实验的持续时间内完全填满了间隙。然而，仅凭图像判断，这种闭合是否由于药物对细胞运动和/或增殖产生直接影响是不清楚的。
使用Cell AnalysisToolbox可定量间隙面积（黑线）的变化，证实用50μMLPA（虚线）处理的细胞与对照细胞（实线）相比间隙闭合更快。 然而，在?20h之后，对照组和LPA处理的细胞之间的干质量（红线）是明显不同的，这表明药物诱导细胞生长速率发生了变化。因20小时后，间隙面积的变化受细胞分裂影响，这之后对细胞迁移能力的测量已经变不准确了。
来自用LPA处理的样品的细胞树（细胞的[x，y]位置对时间绘制的3D图）。 这突出了间隙两侧的三个选定区域的细胞的运动轨迹，并且显示在间隙缩小测定的过程中可以追踪各个细胞，从而能够直接测量其运动性。
该图显示了以细胞的平均瞬时速度的形式持续统计 33小时以上，可以以完全独立于增殖的方式来评估LPA对细胞运动性的影响。
◆ 技术参数 ◆
透射倒置显微镜
样品台：电动样品台，行程范围：120mm X 75mm
物镜转台：6孔，马达驱动，自动更换
光波波长：650nm
探测器：sCMOS
样品室：自动控制温度，湿度，CO2浓度。
软件：专用Cell Analysis Toolbox
荧光系统
集成Cool LED照明
荧光分析软件与相位分析软件完全集成
荧光通道可升级至7个
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