方案摘要
方案下载应用领域 | 医疗/卫生 |
检测样本 | 全血/血清/血浆 |
检测项目 | |
参考标准 | 国家标准 |
本文建立了一种基于Vanquish超高效液相色谱和QE Focus超高分辨质谱在血清中检测类胰岛素生长因子的方法。该方法采用两步蛋白沉淀和在线固相萃取的方法来实现样品的净化,最终获得了满足高通量临床实验室日常检测的结果。该方法分析每个样本的时间为5分钟,但实际上目标和内标化合物出峰的时间窗口不足20秒,因此在后续的工作中我们可以采用Transcend II TLX-4四通道在线前处理液相系统来将实验室的检测通量提升4倍, 即一分半钟测试一个样本。
类胰岛素生长因子(insulin-like growth factor 1, IGF1)在临床上是一个非常重要的肽段类激素,通常用于评估由于生长激素的紊乱所导致的青少年生长发育的异常。目前国内类胰岛素生长因子1的检测方法主要为免疫法,但采用免疫法检测类胰岛素生长因子1已经被长期的临床实践证明存在以下的不足。第一,各个厂家生产的类胰岛素生长因子1的抗体对目标蛋白的亲和能力不完全一致,因此导致难以形成统一的参考范围[1]。第二,类胰岛素生长因子1在血液中会与类胰岛素生长因子结合蛋白3(Insulin-like growth factor binding protein 3, IGFBP3)结合,而不同厂家的免疫法对于IGFBP3所带来的干扰也不尽相同[2]。第三,最近的基于质谱检测的研究结果表明,在病人人群中,约有0.6%的病人存在类胰岛素生长因子1的蛋白质单点突变[3],而通常免疫法对于蛋白质的蛋白突变是无法区分的。
本文建立了一种基于Vanquish超高效液相色谱和QE Focus超高分辨质谱在血清中检测类胰岛素生长因子的方法。该方法采用两步蛋白沉淀和在线固相萃取的方法来实现样品的净化,最终获得了满足高通量临床实验室日常检测的结果。该方法分析每个样本的时间为5分钟,但实际上目标和内标化合物出峰的时间窗口不足20秒,因此在后续的工作中我们可以采用Transcend II TLX-4四通道在线前处理液相系统来将实验室的检测通量提升4倍, 即一分半钟测试一个样本。
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