方案摘要
方案下载应用领域 | 制药/生物制药 |
检测样本 | 生物药品原料 |
检测项目 | 含量测定 |
参考标准 | 国标 |
氨基酸是构成人体所需蛋白质的基本物质,是一类含有氨基和羧基的有机化合物。大部分氨基酸通常紫外吸收较弱,直接使用紫外方法检测干扰较大,灵敏度低。故通常需要通过合适的衍生试剂经衍生化增加生色团后,再使用紫外检测以提高其检测灵敏度。目前用于氨基酸衍生化反应的方法和试剂很多,主要分为柱前和柱后衍生,柱前衍生又有离线和在线衍生。衍生化试剂主要有异硫氰酸苯酯(PITC)、氨基甲酸酯(AQC)、邻苯二甲醛(OPA)、芴甲基氯甲酸甲酯(FMOC)和二硝基氟苯(DNFB)等[1-3],不同的衍生化试剂在反应原理、效率及稳定性等方面不尽相同。
本文在赛默飞全新Vanquish Core液相色谱平台上,结合OPA&FMOC衍生试剂和Vanquish Core用户自定义进样功能实现了在线针内衍生氨基酸分析,同时结合赛默飞特色的电雾式检测器和Hypercarb多孔石墨化碳色谱柱,实现了无需衍生的直接分析氨基酸方法。前者实现了在线衍生自动化,同时提升了衍生程序编辑效率,后者可以实现无需衍生直接分析,大大简化了前处理步骤。两种方法在灵敏度方面基本相当,但在重现性方面,非衍生-电雾式检测方法体现出较大的优势,为相关制药及食品等行业客户在氨基酸检测方面提供了新的思路。
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