方案摘要
方案下载应用领域 | 生物产业 |
检测样本 | 其他 |
检测项目 | |
参考标准 | 暂无 |
在生产和纯化过程中,蛋白质能表现出多种电荷异质性改变。这些变化不仅影响 稳药物的定性,也影响活性,而且还可能导致有害的免疫反应。所以,开发和生产过程中蛋白药物的电荷异构体分析非常关键。电荷变异体的表征通常是用等电聚焦或离子交换色谱进行的。等电聚焦 (IEF) 通过等电点 (PI) 进行蛋白质的分离,常规用于重组蛋白电荷异构体的指纹图分析。与传统的平板凝胶等电聚焦电泳相比,毛细管等电聚焦电泳 (cIEF) 具有更高的分离度、分析速度,定量能力和自动化性能。
在生产和纯化过程中,蛋白质能表现出多种电荷异质性改变。这些变化不仅影响稳药物的定性,也影响活性,而且还可能导致有害的免疫反应。所以,开发和生产过程中蛋白药物的电荷异构体分析非常关键。电荷变异体的表征通常是用等电聚焦或离子交换色谱进行的。
等电聚焦(IEF) 通过等电点(PI) 进行蛋白质的分离,常规用于重组蛋白电荷异构体的指纹图分析。与传统的平板凝胶等电聚焦电泳相比,毛细管等电聚焦电泳 (cIEF)具有更高的分离度、分析速度,定量能力和自动化性能(图1)。
基于游离胶的溶液内等电聚焦技术利用固定化的pH 梯度实现蛋白质混合物的分级分离。相对于传统的凝胶电泳,溶液中的样品更容易被回收,便于后续应用,如粒度分析或液质分析。安捷伦的OFFGEL 系统可以进行基于等电点(PI) 的多肽和变性以及未变性蛋白质的分级分离,分辨率高达0.1 pH 单位。该技术能使约80% 的组分进入溶液中,20%留在胶条上,所以它是一个定性技术,而不是定量技术。
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