方案摘要
方案下载应用领域 | 公安/司法 |
检测样本 | 司法鉴定 |
检测项目 | |
参考标准 | / |
Agilent Chem Elut S 是一款使用合成吸附剂进行固相支持液液萃取 (SLE) 的全新样品前处理产品。本应用简报介绍了采用 Chem Elut S 96 孔板 (400 mg) 对人体尿液中的24 种滥用药物 (DOA) 进行 LC/MS/MS 定量分析。使用 β-葡萄糖醛酸酶对尿液样品进行酶解,然后加载到 Chem Elut S 400 mg 96 孔板上。将水相样品吸附到填料中并平衡 5 分钟,然后用甲基叔丁基醚 (MTBE) 洗脱得到含目标分析物的洁净萃取物。对该方法的准确度和精度进行验证,除一种化合物外,其余化合物均得到了出色的回收率 (100% ± 20%) 和精度 (%RSD
在法医毒理学中,生物样本中 DOA 的快速、可靠定量在法医学检测领域引起了极大关注[1–3],主要原因是 DOA 和提交分析的样品数量日益增多。DOA 尿液检测是用于人体中 DOA 筛查和定量最常见的法医学检测手段之一。尿液基质没有其他生物基质(如血浆和血清)那么复杂。而其中含有大量不同的盐类,会对检测可靠性和仪器可用性造成影响。因此,基质净化和 DOA 萃取前需要进行适当的样品前处理。此外,对于以下萃取和分析,在样品前处理之前,通常需要对 DOA 分析物进行糖基化并使用 β-葡萄糖醛酸酶进行酶解,以释放游离药物[4]。
常用的 DOA 分析样品前处理技术包括LLE、固相萃取 (SPE) 和 SLE。LLE 步骤较为繁琐,需要大量的样品混合、手动相分离,以及不定时的离心来破坏乳浊液。此外,LLE 与 SLE 相比因过程繁琐难以实现自动化。在传统的 SLE 中,将水相样品加载到含硅藻土 (DE) 的吸附剂柱床,其中的水相样品以薄膜形式涂覆在材料上。然后让与水不混溶的溶剂通过 SLE柱床,从样品中提取出目标分析物,并将其洗脱至收集管用于后续处理和分析。与传统 LLE 相比,使用 SLE 时水相和有机相表面之间的相互作用明显增强,从而改善了从水相到有机相的分析物分配,成功替代了混合步骤。与传统 LLE 相比,SLE节省了大量的时间和人力,并简化了操作,提高了重现性。
此外,DE 是一种由不规则石化微生物组成的天然材料,难以控制吸附剂颗粒批次间的一致性。吸附剂的多样性使产品生产和质量控制复杂化,并导致产品性能的不一致。与合成填料相比,DE 的持水量更低且各不一致。Chem Elut S吸 附 剂 极 大 提 高 了 持 水 量 , 改 善 了 批间一致性和性能一致性。96 孔板的设计为样品和洗脱液提供了较大的顶空,在施加压力/真空前,上方的方形筛板可以放置样品,设计的全裙板可实现硬件兼容性以及快速、一致的洗脱。
本研究采用 Chem Elut S 2 mL 96 孔板(400 μL) 定量测定人体尿液中的 24 种DOA。并根据回收率、重现性和易用性,对 Chem Elut S、LLE 和基于 DE 的 SLE进行了实验比较评估。
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