方案摘要
方案下载应用领域 | 医疗/卫生 |
检测样本 | 绒毛膜组织 |
检测项目 | |
参考标准 | - |
天美代理的日本KURABO公司的核酸提取仪采用专利的多孔膜法可以完美解决RNA降解的问题,具有操作简单,得率纯度高,片段完整,无需离心(可以直接放在安全柜操作)等优点。
RNA是以DNA的一条链为模板,以碱基互补配对原则,转录形成的一条单链,主要功能是使遗传信息能够翻译成蛋白行使生物学功能,是遗传信息向表型转化过程中的桥梁。当我们研究基因的表达和调控时,第一步需要做的就是从组织或细胞中分离和纯化RNA。
首先了解一下RNA提取的小原则:
1.保证RNA的完整性;
2.获得高纯度的RNA;
3.操作简便,稳定性强。
抽提RNA的使用目的:
1.cDNA文库构建要求RNA完整而无酶反应抑制物残留;
2.Northern对RNA完整性要求较高,对酶反应抑制物残留要求较低;
3.RT-PCR对RNA完整性要求不太高,但对酶反应抑制物残留要求严格。
因此,明确实验目的是进行后续实验的首要条件。
Trizol法抽提:
Trizol是一种常用的总RNA抽提试剂,内含异硫氰酸胍等物质,能迅速裂解细胞,抑制细胞释放出的核酸酶活性。目前常用Trizol法进行提取组织或细胞中的RNA,步骤如下:
液氮研磨--加入Trizol裂解混匀--加入氯仿抽提--离心--加入异丙醇沉淀--离心--酒精洗涤--离心--无酶水重溶。
Trizol作为RNA提取的常用方法,具有一下缺点:
1.操作步骤较复杂;
2.耗时长;
3.会用到氯仿等有毒试剂;
4.新手成功率低。
天美代理的日本KURABO公司的核酸提取仪采用专利的多孔膜法可以完美解决RNA降解的问题,另外具有操作简单,得率纯度高,片段完整,无需离心(可以直接放在安全柜操作)等优点,具体如下:
个人型核酸纯化仪Mini480和Mini8L
模块互换,一机两用
Mini480和Mini8L设计小巧,方便携带,可在实验室随意空间放置,空间占用小,更方便,对于P2,P3实验室内以及危险生物实验样品,可放置在安全柜,实验台等地方进行提取工作,可使用所有试剂盒,步骤如下:
加入试剂后手动转动增压轮,3次后进行洗涤,最后一次将管架拿到前面一排,在加入洗脱试剂后,转动增压,即可对DNA/RNA样品进行洗脱,收集。8个样品完成DNA/RNA样品纯化只需8分钟。
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