蛋白质含量的测定方法检测仪器_检测方案_北京来亨科学仪器有限公司

方案摘要

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应用领域	食品/农产品
检测样本	蛋白饮料
检测项目	营养成分>蛋白质
参考标准	企业

考马斯亮蓝（Coomassie Brilliant Blue）测定蛋白含量存在着两种不同颜色形式，红色和蓝色。此染料与蛋白质结合后颜色由红色形式转变蓝色形式，最大光吸收由465nm变成595nm。在一定蛋白质浓度范围内，蛋白质和染料结合符合比尔定律（Beer’s law），因此可以通过测定染料在595nm处吸收的增加量得到与其结合的蛋白质量。本法测定范围为10~100µg蛋白质。

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配置单

来亨L-805A全自动凯氏定氮仪
型号：L-805A

¥5万 - 10万
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方案详情

一、实验原理

考马斯亮蓝（Coomassie Brilliant Blue）测定蛋白含量存在着两种不同颜色形式，红色和蓝色。此染料与蛋白质结合后颜色由红色形式转变蓝色形式，最大光吸收由465nm变成595nm。在一定蛋白质浓度范围内，蛋白质和染料结合符合比尔定律（Beer’s law），因此可以通过测定染料在595nm处吸收的增加量得到与其结合的蛋白质量。本法测定范围为10~100µg蛋白质。

由于该法简单、迅速、干扰物质少、重复性好、灵敏度高，现已广泛应用于蛋白质含量测定。

二、实验用品

(一)器材

(1) 722分光光度计。

(2) 微量进样器。

(3) 移液管（0.1ml及5ml）。

(4) 试管及试管架。

（二）试剂

(1)标准蛋白质溶液：结晶牛血清白蛋白，预先经微量凯氏定氮法或按牛血清白蛋白OD^1%_1cm=6.6测定蛋白质含量，再用0.15mol/L NaCl配制成1mg/ml蛋白质溶液。

(2)考马斯亮蓝试剂：考马斯亮蓝G-250 100mg溶于50ml 95%乙醇中，加入100ml 85%磷酸，用蒸馏水稀释至1000ml，滤纸过滤。最终试剂中含0.01%（W/V）考马斯亮蓝G-250，4.7%（W/V）乙醇，8.5%（W/V）磷酸。

(三)材料

末知蛋白质溶液，要求蛋白质浓度范围为0.1~5mg/ml，若浓度过度时，需用0.15mol/LNaCl溶液适当稀释。