目前检测黄曲霉毒素主要有薄层色谱法 ( TLC )、免疫亲和柱-高效液相色谱法( HPLC- FL)、酶联免疫法( ELISA)、免疫亲和柱-高效液相色谱法串联质谱法等,薄层色谱法和酶联免疫法主要应用黄曲霉毒素的定性,不能准确定量,免疫亲和柱-液相色谱法和液相色谱法-串联质谱能够准确定量,但是由于免疫亲和柱与质谱检测成本高,应用范围受到限制。
方法优势:
对比国标方法《GB/T 18979-2003 食品中黄曲霉毒素的测定 免疫亲和层析净化高效液相色谱法和荧光光度法》,迪马科技开发的《DHA冬化油和植物油中黄曲霉毒素B1的测定》采用检测成本较低的固相萃取-液相色谱法,也可达到准确定性定量,并且本方案具有:
前处理步骤简单、回收率高、方法稳定性好等特点;
避免了免疫亲和柱容易受环境影响而引起黄曲霉毒素B1回收率低和净化效果不好的弊端,保证了实验结果的重现性和准确性;
过柱方法简单易操作,对操作人员要求不高,检测成本相对较低,能被很多企事业单位采用;
检出限是0.1 μg /kg,远低于国家标准和欧盟标准
(欧盟对植物油中黄曲霉毒素B1限量标准不得高于 2 μg /kg,我国标准《GB 2761-2011 食品安全国家标准 食品中真菌毒素限量》对其限量要求不得高于10 μg /kg)
以下为详细解决方案,敬请参考!
1、适用范围
本方案适用于DHA冬化油和植物油中黄曲霉毒素B1的检测,方法检出限是0.1 μg /kg。
2、提取
(1) 取0.5 g样品于15 mL离心管中,加入2 mL正己烷混匀,加入10 mL乙腈,涡旋混合2 min,6000 rpm下离心2 min,收集上清液;
(2) 向步骤(1)下层残渣中加入10mL乙腈,按照步骤(1)重复提取一次,收集上清液。
(3) 合并步骤(1)、(2)的上清液,在40 ℃下减压蒸至低于5 mL,待净化。
3、净化——ProElut AFT-2 12 mL(Cat.#65906)
a活 化:向柱中加入10 mL乙腈,流出液弃去;
b上 样:加入待净化液,收集流出液;
c洗 脱:加入20 mL 乙腈,收集流出液,合并步骤(b)、(c)流出液;
d衍 生:将流出液在40 ℃下减压蒸至完全干燥,依次加入0.5 mL正己烷和0.5 mL三氟乙酸,旋紧玻璃塞充分混匀衍生液,45 ℃静置10 min,吹干衍生液,用流动相定容至1 mL。
4、色谱条件
色谱柱:Diamonsil C18(2), 250 mm × 4.6 mm, 5 μm(Cat# 99603)
流 速:1.0 mL/min
进样量:20 μL
柱 温:30 ℃
检测器:荧光检测器,Ex:365 nm;Em:435 nm
流动相:A:水;B:异丙醇+乙腈=3+2;A/B=8/2
5、添加回收结果
DHA冬化油中黄曲霉毒素B1的HPLC检测添加回收结果
植物油中黄曲霉毒素B1的HPLC检测添加回收结果
油脂中黄曲霉毒素B1检测专用固相萃取柱
货号:65906
描述:ProElut AFT-2 12 mL 20/pkg
产品特点:ProElut AFT-2专用柱填料由多种吸附剂按照一定的比例分层填装而成,采用多种作用机理去除油脂以及其他杂质,适用于油脂类样品中黄曲霉毒素B1的检测;本产品避免了免疫亲和柱容易受环境影响而引起黄曲霉毒素B1回收率低和净化效果不好的弊端,保证了实验结果的重现性和准确性;本产品过柱方法简单易操作,对操作人员要求不高,成本相对较低,能被很多企事业单位采用。
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