人血中水溶性维生素的检测

2024/05/28   下载量: 0

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应用领域 医疗/卫生
检测样本 全血/血清/血浆
检测项目 生化检验>维生素
参考标准 /

建立水溶性维生素的固相萃取技术搭配 LC-MS/MS 的检 测方法,满足临床检测的基本需求。

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配置单
方案详情

1、前处理过程 

固相萃取产品:水溶性维生素专用板 标准品配置过程:标准样品配置方法:预备 1 mg/mL 的各个水溶性维生素标准储备 水溶液 。对于维生素 B2、 B7 和 B9,加入 200μL 1 N NaOH 进行溶解。将维生素 C 溶解在低 pH 的醋酸盐缓冲液中以提高其稳定性。使 用这些单独的储液制成混合储液,具体操作为加入 1.25 mL 维生素C 储液以及其他储液各 0.025 mL,然后用水 稀释至 25 mL。将此混合储液( 50 ppm 维生素C,1 ppm 其他分析物)进一步稀释,得到表 2 所列出的 11 种校准 标准品。(维生素 C 不稳定,需要当天使用当天配置) 样品制备过程:用移液枪准确吸取 100μL 血清样本于 2ml 离心管中,加入 600μL 甲醇、10ul 抗氧化剂涡旋混 合 1min,8000r/min 离心 5min,取上清液待净化。 取水溶性维生素专用板,加入待净化上清液,用正压装 置将板中的样品压下,流速控制在 2~3 秒/滴,待液滴 流尽后继续保持 1min。 浓缩:在 37℃条件下,氮气吹干,用初始比例的流动 相复溶,待检测。

2、检测条件

2.1 色谱条件 

色谱柱: Venusil MP C18(3.0*50 mm, 3μm, 100 Å) 流动相A:10mM 乙酸铵 0.75%甲酸 水 (%) 流动相B:10 mM 乙酸铵 0.75%甲酸甲醇 (%) 流 速:600 μL/min; 柱 温:30 ℃; 进样量:10 μL; 

2.2质谱条件 

LC-MS/MS:Sciex 4000+ 扫描模式:电喷雾电离正模式采集模式:多反应监测(MRM) 

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文献贡献者

艾杰尔飞诺美
金牌会员第16年
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