高纯度RNase A纯化工艺方案分享

2023-11-27 10:16  下载量:2

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提取及粗纯方案 我们基本采用牛胰腺硫酸铵盐析粗提物(由McDonald根据Kunitz氏纯化方法修改,“Methods in Enzymology”,Vol.ⅡP429,1955.)。 精纯方案 我们使用CM Tanrose 6FF为层析介质。这是月旭科技研发的一款高流速琼脂糖基架弱阳离子交换介质填料。以6%高度交联的琼脂糖为基架的介质,平均粒径及粒径范围分别为90μm,45-165μm,具有流速快、分辨率高的优点,是大规模生物分子分离纯化的首选介质。洗脱后的核糖核酸酶A纯度可提升至71~86%,并通过进一步去杂后,最终纯度大于95%,最终收率约56%。

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