大豆磷脂中的磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺检测向来对硅胶柱的要求比较高,市面上的很多硅胶柱的分离度都达不到要求。今天为您带来月旭科技Topsil® (拓谱)Silica色谱柱对大豆磷脂中的磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺的测定,我们一起来看一下,月旭科技的色谱柱能不能达到要求!
色谱条件
色谱柱:Topsil® (拓谱)Silica,5μm, 4.6×250mm。
流动相:
流动相A:甲醇-水-冰醋酸-三乙胺=85-15-0.45-0.05;
流动相B:正己烷-异丙醇-流动相A=20-48-32;
检测波长:ELSD检测器,漂移管温度72,气流速2.0L/min;
柱温:40℃;
流速:1.0ml/min;
进样量:20μl。
样品溶液的配置
混合对照溶液:精密称取磷脂酰乙醇胺,磷脂酰肌醇,溶血磷脂酰乙醇胺,磷脂酰胆碱,溶血磷脂酰胆碱对照品各适量,加三氯甲烷-甲醇(2-1)溶解,制成每1ml中含上述对照品分别为50μg,100μg,100μg,200μg,200ug的混合溶液。
样品溶液:精密称取样品15mg至50ml容量瓶,加三氯甲烷-甲醇(2-1)溶解稀释至刻度,摇匀,即得。
谱图和数据
1、空白溶液:
2、混合对照溶液:
3、供试品溶液:
结论
色谱柱:Topsil® (拓谱)Silica, 5μm, 4.6×250mm
磷脂酰乙醇胺与磷脂酰肌醇分离度(R≥1.50):4.07
磷脂酰肌醇与溶血磷脂酰乙醇胺分离度(R≥1.50):2.35
溶血磷脂酰乙醇胺与磷脂酰胆碱分离度(R≥1.50):29.34
溶血磷脂酰胆碱与磷脂酰胆碱分离度(R≥1.50):14.52
磷脂酰胆碱理论塔板数(N≥1500):12855
磷脂酰乙醇胺理论塔板数(N≥1500):10158
磷脂酰肌醇理论塔板数(N≥1500):7824
是否符合要求:符合
Topsil® (拓谱)Silica, 5μm, 4.6×250mm色谱柱更适合检测该项目。
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