一枚合格的流通池,
必须经得住长期压力,
任劳任怨,经历成百上千次测试,
一块面板上不止一颗螺丝钉,
一台检测器却只有一枚流通池。
一枚合格的流通池,需要满足以下要求:
1
获得理想的检测限;
2
获得理想的噪音、漂移和信号;
3
还在于成百上千次的检测后,质量如一,稳定可靠。
流通池示意图
我们先来看看紫外检测器的工作原理,紫外检测器的检测原理基于朗伯—比尔定律,吸光物质的吸光度与流通池的光程长度和浓度成正比。
比尔—朗伯定律数学表达式:
A=lg(1/T)=Kbc
A为吸光度,T为透射比(透光度),是出射光强度比入射光强度。
K为摩尔吸光系数。它与吸收物质的性质及入射光的波长λ有关。
c为吸光物质的浓度,单位为mol/L。
b为吸收层厚度(流通池的长度),单位为cm。
当一束平行单色光垂直通过某一均匀非散射的吸光物质时,其吸光度A与吸光物质的浓度c及吸收层厚度(流通池的长度)b成正比,而与透光度T成反相关。
检测器流通池的长度越长,光程越长,响应越高,检测限越低。定量分析的准确度很大程度上取决于浓度检测线性范围。分析液相的流通池光程通常比制备液相的流通池光程大,以获得低浓度下更好的响应。
紫外检测器的光路示意图
下面我们用一个实验来验证一下0.5mm, 1.25mm和3mm等三种不同光程的流通池,在同一色谱条件下,对同一个样品进行分析后,形成的色谱图的差异。
由上图我们可以知道,使用较长光程的流通池检测同一个样品,生成的信号越强,获得更高的峰高,更好的响应。尽管通常增加光程会使噪声提高,但噪音提高幅度很小,信噪比还是会增大,一般适用于分析型液相色谱应用。使用小光程的流通池,峰高降低,但对某些峰有一定的分辨率,噪音较小,在应用上,一般适用于制备型液相色谱。
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