玩转免疫亲和小柱

霉菌毒素是由霉菌产生的有毒代谢产物,有较强的致癌性和降低免疫力作用。常见的霉菌毒素主要有黄曲霉毒素、赭曲霉毒素,呕吐毒素、单端孢霉烯(T-2毒素)、玉米赤霉烯酮、串珠镰刀菌素、伏马菌毒素等。粮食及饲料很容易受到霉菌毒素的污染,这一问题越来越成为现代农业生产中不可忽视的重大难题。

月旭科技利用其强大的科研力量和先进的生产工艺开发出了一系列霉菌毒素免疫亲和柱产品,该系列产品通过了多次科学实验的检验,得到了多个官方检测机构的认证,并广泛适用于各检测实验室、进出口机构等。

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组成结构

一般一支完整的免疫亲和柱由6部分组成:

• 柱管(1mL/3mL)

• 固定相(琼脂糖凝胶)

• 抗体(琼脂偶联特异性抗体)

• 保护液(通常是缓冲溶液保持琼脂润湿)

• 筛板以及上下顶盖(防止柱液流失)

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原理

免疫亲和柱技术即免疫亲和层析技术,属于样品前处理过程中一种简化样品提取过程,有效提高样品纯度的净化技术,由于其特异性强在食品分析中属于痕量检测,检测限非常低。Welchom®免疫亲和柱用于从样品中分离、纯化真菌毒素,基于抗原与抗体之间的特异性反应。免疫亲和柱中的抗体通过共价键作用悬浮在凝胶中,特异性吸附样品中的真菌毒素。如果供检测的样品中含有真菌毒素,样品通过免疫亲和柱时,毒素被抗体捕捉结合。所有其他物质,被从免疫亲和柱中清洗出去。甲醇作为洗脱液,将真菌毒素将抗体上洗脱。

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使用方法

使用前先将亲和柱恢复至室温,放掉柱子的保护液,然后进行上样、淋洗、洗脱过程。

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注意事项

1)上柱的样品溶液应该保持酸碱中性、无悬浮物、甲醇浓度不宜过高;

2)样品为复杂样品时(如高蛋白、高油脂、酸性样品),可将提取液分两次提取样品,提高提取效果;

3)样品过柱及甲醇洗脱速度要慢且均匀,约每秒1-2滴;

4)抗原抗体发生反应的最佳温度是在25℃左右,实验需要的环境温度最好是室温24℃-28℃,太高或太低的温度都会对亲和柱的回收率有一定的影响。亲和柱在使用前需要恢复至室温再进行实验;

5)亲和柱不要在无水状态下,琼脂容易干燥萎缩,影响亲和柱的质量;

6)亲和柱储存条件为4℃-8℃。切记0℃以下的低温,因为缓冲液冻结,会严重影响亲和柱内的物理结构,对亲和柱的质量影响很大;

7)洗脱一般选择试剂甲醇,为增强洗脱效果可加大甲醇体积;

8)样液免疫亲和柱净化后,洗脱液过0.45μm或更小孔径滤膜效果更好。

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产品信息

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