稳定的pH环境在HPLC检测中的重要性

月旭科技（上海）股份有限公司

在液相色谱中，经常会在流动相中加入缓冲溶液，其目的之一就是使整个HPLC系充处理一个稳定的化学环境，从而使检测具有更好的重现性。若系统的pH不够稳定，则会出现保留时间漂移，多次检测保留时间不能重现，多组分出峰顺序，峰组成不一致等等的各种问题。

特别是酸碱性成分的检测，pH值对其保留与峰型都有很大的影响，因此，这些成分检测时，HPLC系统的pH稳定性就非常的重要，需在流动相中加入相应的缓冲盐来保持系统的稳定性。例如我们平常使用的盐例如磷酸在1.5-3.5的pH范围内，有比较好的缓冲能力。

实例：

某成分原流动相仅使用冰醋酸调节pH值，但并未加缓冲盐体系，因HPLC系统的pH值不够稳定，而导致的样品检测时某一个峰产生漂移，多次实验，结果不能重现的问题。

图1：流动相中没有缓冲溶液，系统pH值不稳定

在这个实例中，原流动相没有缓冲能力，pH值不稳定，将流动相替换成盐后，能提供稳定的缓冲能力，使各个物质到达较满意的分离，并具有比较好的重现性。

图2：在流动相中加入缓冲盐，使系统pH保持稳定

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