液相色谱是我们实验室常用的定性定量分析仪器之一,各行各业的研发及质检实验室都会有他们的身影。今天我们来盘点一下,那些年我们用的液相色谱检测器。
我们最常见zui常用的就是紫外检测器,大多数适用于液相分析的有机物都有紫外吸收,紫外检测器是专属检测器,灵敏度高,操作相对简单。据有关文献收录,紫外检测器在液相检测器中的使用占比可高达65%左右。
高效液相色谱仪检测器使用比例
不同的检测器各有优缺点,下表为常见几种检测器的比较:
1. 紫外检测器
UV检测器分为固定波长检测器、可变波长检测器(VWD)和光电二极管阵列检测器(PDA或DAD)。按光路系统来分,UV检测器可分为单光路和双光路两种。可变波长检测器又可分单波长(单通道)检测器和双波长(双通道)检测器。
紫外检测器通常都是先分光,取得单色光再通过流通池,然后用光电二极管检测,因此只能获得特定波长的信号。它的工作原理是由光源产生波长连续可调的紫外光或可见光,经过透镜和遮光板变成两束平行光,无样品通过时,参比池和样品池通过的光强度相等,光电管输出相同,无信号产生;有样品通过时,由于样品对光的吸收,参比池和样品池通过的光强度不相等,有信号产生。
紫外检测器光路图
二极管阵列检测器则是复色光先通过流通池,再分光,整个光谱由二极管阵列检测,因此能获得一段光谱范围内的所有信号。PDA(或DAD)是一种光学多通道检测器,它可以对每个洗脱组分进行光谱扫描,经计算机处理后,得到光谱和色谱结合的三维图谱。其中吸收光谱用于定性(确证是否是单一纯物质),色谱用于定量。
二极管阵列检测器光路图
UV检测器的典型光源为氘灯,它发出的光在190~400nm的波长范围内有适宜的光强度。它的定量原理是Lambert-Beer定律,即当一束单色光透过流通池时,若流动相不吸收光,则吸收度A与吸光组分的浓度C和池的光径长度L成正比。
2. ELSD检测器(ELSD的检测原理分三步):
● 雾化过程
用惰性气体或净化空气将色谱柱流出物雾化,流动相和气体混合喷成均匀的雾滴。
● 蒸发过程
在漂移管中将流动相挥发,雾滴经过加热的漂移管,流动相被蒸发,溶质形成极细的颗粒。
● 检测过程
测定留下来的样品颗粒的光散射,溶质颗粒气流在检测池被光束照射,其散射光被光电二极管转变为电信号输出。
ELSD可作为高效液相色谱、高速逆流色谱、超临界流体色谱等色谱的检测器。作为新型的通用型检测器,它具有以下优点:
● ELSD检测不依赖于样品的光学性质,只要沸点小于流动相的物质,都可以在ELSD上产生响应。
● ELSD可以很好的支持梯度洗脱,蒸发光散射检测可以消除流动相配比变化对基线产生的影响。
● 辅助载气提高了检测灵敏度,保持检测池内的清洁,避免污染。
但是,相对于UV检测器,ELSD检测也有一定的特殊性。ELSD检测要求流动相及流动相中加入的修饰剂必须有良好的挥发性,这样就使非挥发性的缓冲盐的应用受到了限制。与UV检测器相比,ELSD检测的灵敏度略低。
紫外检测器及蒸发光散射检测器是我们实验室常用的两类检测器,月旭科技可提供多种不同类型的液相色谱检测器,其中ELSD5450可兼容国内外多种品牌的液相色谱仪,成为您实验室液相扩展的得力帮手。
如需了解更多ELSD使用知识,请参见:
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