2020版《中国药典》一部中药材中黄曲霉毒素的检测

2020/08/18   下载量: 0

方案摘要

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应用领域 制药/生物制药
检测样本 中药材和饮片
检测项目
参考标准 2020版《中国药典》一部

黄曲霉毒素(AFT)是一类真菌(如黄曲雷和寄生曲霉)的有毒的代谢产物,其衍生物有约20种,分别命名为B1、B2、G1、G2、M1、M2、GM、P1、Q1、毒醇等,其中以B1的毒性最大,致癌性z强。(欢迎索取纸质数据。)

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配置单
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黄曲霉毒素(AFT)是一类真菌(如黄曲雷和寄生曲霉)的有毒的代谢产物,其衍生物有约20种,分别命名为B1、B2、G1、G2、M1、M2、GM、P1、Q1、毒醇等,其中以B1的毒性最大,致癌性z强。(欢迎索取纸质数据。)

 

h曲霉毒素主要存在于药材、谷物、坚果、棉籽以及动物饲料相关的产品中。当人摄入量大时,可发生急性中毒,出现急性肝炎、出血性环死、肝细胞脂肪变性和胆管增生。当微量持续摄入,可造成慢性中毒,生长障碍,引起纤维性病变,致使纤维组织增生。


各级食品药品监管部门不断加大中药生产流通监管力度,努力保持中药质量总体稳定。

 

色谱条件

色谱柱:月旭Ultimate® ODS-3 (4.6×300mm,5μm);

流动相:甲醇/乙腈/水=300/220/480;

柱温:30℃;

检测波长: 激发波长:360nm,

发射波长:450nm;

衍生方法:光化学衍生;

流速:0.8mL/min;

进样量:25μl。

 

流动相的配置

流动相配制:精密量取甲醇300ml、乙腈220ml、超纯水480ml,充分混匀后经0.45 μm滤膜抽滤,即得。

 

样品溶液的制备

标准储备液:精密量取h曲霉毒素混合对照品溶液(h曲霉毒素B1、h曲霉毒素B2、h曲霉毒素G1、h曲霉毒素G2标示浓度分别为1.0μg/ml、0.3μg/ml、1.0μg/ml、0.3μg/ml)1ml,置于20ml容量瓶中,加甲醇稀释至刻度,作为标准储备液,摇匀,备用。

 

混合对照品溶液:精密量取标准储备液1ml,置于25ml容量瓶,加甲醇稀释至刻度,摇匀,即得。

 

供试品溶液:取供试品粉末15g,精密称定,置于均质瓶中,加入氯化钠3g,精密加入70%甲醇75ml。高速搅拌2分钟(搅拌速度大于11000r/min);离心5分钟(离心速度4000 r/min),精密量取上清液15ml,置于50ml容量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,离心10分钟(4000 r/min),精密量取上清液20ml,通过月旭Welchrom®h曲霉毒素免疫亲和小柱,流速3ml/min,用20ml水洗脱,弃去洗脱液,使空气进入柱子,再用1.5ml甲醇洗脱,收集洗脱液,置于2ml容量瓶,加甲醇稀释至刻度,摇匀,用微孔滤膜过滤,取续滤液,即得。

 

标准曲线的绘制

分别精密吸取上述混合对照品溶液5μl、10μl、15μl、20μl、25μl注入液相色谱仪,测定峰面积。以进样量为横坐标,峰面积为纵坐标绘制标准曲线。

 

结果汇总

中药中h曲霉毒素测定结果汇总


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