方案摘要
方案下载应用领域 | 制药/生物制药 |
检测样本 | 化药制剂 |
检测项目 | 鉴别>理化法 |
参考标准 | 药物筛选 |
近年来,PD-1/PD-L1免疫检查点抑制剂作为一种新型的癌症免疫治疗方法,在多种癌症治疗中取得了惊人的效果。我们选取的案例正是利用HTRF技术筛选PD-1/PD-L1的抑制剂,其实验原理如图1所示。PD-L1和PD1分别融合标签蛋白Tag1和Tag2,它们被各自的抗体识别Anti-Tag1和Anti-Tag2。由于抗体上标记有HTRF的供体荧光染料Eu和受体荧光染料XL665,所以当PD-L1和PD1靠近并结合时,Eu被激发发出的荧光共振转移到XL665上,使XL665发出荧光,从而被检测到。
AMTK液体处理工作站应用于药物筛选领域
背景:
药物筛选是现代药物开发流程中检验和获取具有特定生理活性化合物的一个步骤,系指通过规范化的实验手段从大量化合物或新化合物中选择对某一特定作用靶点具有较高活性化合物的过程,是临床新药开发的必经过程。
近年来,PD-1/PD-L1免疫检查点抑制剂作为一种新型的癌症免疫治疗方法,在多种癌症治疗中取得了惊人的效果。我们选取的案例正是利用HTRF技术筛选PD-1/PD-L1的抑制剂,其实验原理如图1所示。PD-L1和PD1分别融合标签蛋白Tag1和Tag2,它们被各自的抗体识别Anti-Tag1和Anti-Tag2。由于抗体上标记有HTRF的供体荧光染料Eu和受体荧光染料XL665,所以当PD-L1和PD1靠近并结合时,Eu被激发发出的荧光共振转移到XL665上,使XL665发出荧光,从而被检测到。
当PD-1/PD-L1抑制剂存在时,将阻碍Tag1-PD-L1蛋白与Tag2-PD-1的结合,从而影响到XL665的荧光信号的强度。
筛选实验步骤(图2)
1. 药品在96孔板中进行梯度稀释;
2. 药品从96孔板中吸取2 μL加到384孔板中 ,每个浓度重复2次;
3. 加入4 μL Tag1- PD-L1蛋白,混匀;
4. 加入4 μL Tag2-PD1蛋白,混匀;
5. 室温孵育15min;
6. 将Anti-Tag1-Eu(供体荧光染料Donor)和Anti-Tag2-XL665(受体荧光染料Acceptor)等体积混匀,为检测混匀液;
7. 加入检测混匀液10 μL,混匀;
8. 室温孵育1-3h;
1. 多功能酶标仪读板检测。(这个地方可以设计成表格)
这个地方可以用表格呈现。
奥美泰克自动化解决方案
1, 根据实验设计,制定自动化方案,主要功能配置如下
设备或附件名称 | 图示 | 数量 | 性能参数 |
LH1406多功能液体处理工作站 | 1 | 12个标准板位 | |
温控模块 |
| 1 | 温度范围:20~100℃ 温度精度:正负1℃ |
8通道移液头-250 μL |
| 1 | 移液范围:2 μL~200 μL 移液精度:2 μL CV<5% |
8通道移液头-70 μL |
| 1 | 移液范围:1 μL~50 μL 移液精度:2 μL CV<5% |
2、 AMTK LH1406多功能液体处理工作站台面布置
3、AMTK LH1406 多功能液体处理工作站操作流程
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