地西他滨是一种天然2′-脱氧胞苷酸的腺苷类似物,通过抑制DNA甲基转移酶,减少DNA的甲基化,从而抑制肿瘤细胞增殖以及防止耐药的发生,为目前已知最强的DNA甲基化特异性抑制剂,属于S期细胞周期特异性药物,适用于治疗骨髓增生异常综合征。胞苷、5-氮杂胞苷、地西他滨、阿糖胞苷等胞苷类似物均为核酸抗癌药物,在白血病治疗中起到重要作用。
使用CAPCELL PAK ADME-HR S5色谱柱、CAPCELL PAK 高极性C18色谱柱及其他公司C18色谱柱,在反相模式下对四种胞苷类化合物进行了分析对比。
1. 胞苷(50 μg/mL)
Cytidine (M.W. 243.2)
2. 5-氮杂胞苷(50 μg/mL)
5-Azacytidine (M.W. 244.2)
3. 地西他滨(50 μg/mL)
5-Aza-2’-deoxycytidine (M.W. 228.2)
4. 阿糖胞苷(50 μg/mL)
Cytarabine (M.W. 243.2)
同时具有高表面极性和适当疏水性的CP ADME-HR色谱柱,在保留能力上与高极性C18色谱柱近似,同时又体现出与C18色谱柱不同的分离选择特性,从而得到了良好的分离结果(如下图所示)。
【色谱条件】
色谱柱: 5 μm, 4.6 mm i.d. x 150 mm
流动相: 10 mmol/L HCOONH4
流动速: 1 mL/min
温动度: 40 ℃
检动测: UV 260 nm
进样量: 5 μL
溶动剂: H2O
同时,也使用HILIC模式对以上4个胞苷类化合物进行了分析,在HILIC模式下的色谱柱分离选择特性与反相模式大相径庭,胞苷的保留相较地西他滨和5-氮杂胞苷更强(如下图所示)。
【色谱条件】
色谱柱: PC HILIC S5; 4.6 mm i.d. x 150 mm
流动相: 10 mmol/L HCOONH4 / CH3CN = 10 / 90
流动速: 1 mL/min
温动度: 40 ℃
检动测: UV 260 nm
进样量: 5 μL
溶动剂: 70 vol% CH3CN
结 论
综上所述,在反相模式下分析胞苷、5-氮杂胞苷、地西他滨和阿糖胞苷时,CAPCELL PAK ADME-HR比C18色谱柱表现出更好的分离效果和不同的分离选择特性,可以得到更好的分析结果;在HILIC模式下,PC HILIC色谱柱能够对该类化合物获得良好保留,同时准确识别了结构中的差异部分并获得良好分离。
胞苷类化合物分析推荐柱
反相模式 F93374 CP ADME-HR S5; 4.6 x 150
HILIC模式 F93115 PC HILIC S5; 4.6 x 150
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