18世纪的英国,工厂手工业的生产已经不能满足市场的需要,蒸汽机的发明标志着第一次工业更新的发生,从此社会生产力有了巨幅提升,社会形态也从农业、手工业时代进入了工业时代。劳动者们从繁琐的手工劳动中,将精力转为投入到机器操作和技术研发的工作中去。
当今生命科学技术高速发展,智能工艺开发的需求也推进着智能工具的发展。作为层析金标准的ÄKTA层析设备,也在不断发展、升级和改进,为使用者带来更快速、更智能使用体验,加速生物工艺研发的进程。近两年众多ÄKTA智能工具的推出,包括ALIAS高通量自动进样器、多步层析串联解决方案、ÄKTA go parallel平行纯化解决方案、UNICORN Networking、GoSilico机理建模等相继推出,也代表着ÄKTA层析已进入2.0时代。
高通量下游纯化方案
ALIAS自动进样器可与ÄKTA pure或ÄKTA avant联合使用,用于高通量的小量样品纯化,全自动完成1 uL至10 mL体积的多个样品的连续进样。
ALIAS自动进样器拥有独立的流路和样品环,无需配置额外的样品泵等动力系统。
内置高效的针头清洗程序,可以帮助清楚管路和样品针中的残留物。ALIAS具有优异的重复性和精准度,让小量样品的筛选工艺数据更加可靠。
ALIAS自动进样器可以适配多种进样规格,如96微孔板、96深孔板、384孔板、1.5 mL或10 mL样品瓶,紧凑可堆叠的设计和强大的性能非常适合用于样品的过夜连续纯化或高通量筛选。
图1:ALIAS自动进样器与ÄKTA搭配使用
自动进样器有两种不同的版本:分析型ALIAS Bio和制备型ALIAS Bio PREP。ALIAS Bio适用于微量样品的分析实验,ALIAS Bio PREP适用于小量样品的制备纯化。两种型号均可选择制冷模块,该模块可在样品室中降温至4°C,保持样品的生物活性。
图2:使用ALIAS自动进样器连续进样5针,具有良好的重复性
多步串联纯化方案
生物分子下游层析步骤通常需要多种层析方法搭配使用,科研领域需要去除干扰研究的杂质分子,而生物制药领域则需要满足法规要求。每个层析步骤之间的操作过程,如移液、收集、换液等需要人为值守,重复性强也费时费力。
提高下游纯化效率除了选择更优的纯化工艺外,还可以简化样品的中间处理过程,使用多步串联层析方法,可以省去步骤中间的手动操作,节省时间的同时,也减少了人为操作带来的误差。
常用的多步串联分为Loop环模式和Tandem模式的多步串联纯化。
图3:Loop环模式 (A) 和Tandem模式 (B)
通过对ÄKTA pure或 ÄKTA avant流路的改造,或加装额外的功能阀门,可以实现两步到三步层析步骤的串联,利用一个程序,完成多个层析过程,直接拿到纯化的最终结果。最大程度提高实验的自动化水平,提升ÄKTA设备的效率和纯化工艺的速度。
多步纯化方案完全按需定制,根据用户具体实验条件进行调整。Cytiva也已总结了多个高通量多步纯化的自动化案例供您参考。
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