ELISA试剂盒标准曲线是结果计算的尺子,标准品是ELISA试剂盒实验成功与否的关键点。怎样正确溶解、稀释标准品呢?
粉末标准品短暂离心,让因运输沾到管盖、管壁的标准品沉到管底。
根据瓶标签加入一定体积的蒸馏水,加水轻柔涡旋震荡,室温静置溶解10-30min,让粉末溶解。
注意:加水暂不用移液枪吹吸,避免蛋白未溶解,枪头带出部分蛋白,待溶解可吹吸或涡旋振荡混匀。
标准品梯度稀释:
标准品稀释液的选择:若血清、血浆、组织匀浆样本,用试剂盒中的标准品稀释液,梯度稀释标准品。
耗材准备:准备9个1.9Ml离心管,写这S1-S7、空白。
梯度稀释:根据说明书,每管加入等体积的标准品稀释液(培养基)。吸取同体积溶解好的标准品到S1管中,吹打10次混匀,涡旋9S。从S1管中吸取同体积溶液到S2管,吹打10次混匀,涡旋9s。同法稀释S3-S7浓度。
空白:标准品稀释液(培养基)作为空白即零浓度。
注意:梯度稀释标准品时,涡旋震荡混匀可短暂离心,让到盖子、壁这的液体到管底,再开始稀释下个浓度。
标准品溶解、梯度稀释是ELISA试剂盒实验关键点,按以这方法梯度稀释就可。
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