供货周期: | 现货 |
品牌: | MlBio/酶联生物 |
规格: | 50 TESTS |
货号: | ml-k01162 |
CAS号: |
免疫组化试剂盒(适用于兔/小鼠一抗)
中文名称: 免疫组化试剂盒(适用于兔/小鼠一抗)
英文名称: Immunohistochemistry Kit(Apply to rabbit or mouse primary antibody)
相关类别: 抗体相关支持试剂
储 存: 冷藏(2-8℃)
概述
该免疫组化试剂盒适用范围为石蜡包埋组织切片,也可用于固定后的冰冻切片。
特点
操作简便:无需太多准备,拿到试剂盒既能开展试验。 重现性好:实验结果重复性高。
应用
用于免疫组织化学实验,两种包装分别可用于20张和50张切片。
使用说明
1. 组织固定:在脱蜡之前,将切片60°C恒温箱中烘烤60分钟。
2. 脱蜡:将切片用二甲苯浸泡10分钟,更换二甲苯后再浸泡10分钟。
3. 水化:分别用无水乙醇浸泡5分钟;95%乙醇中浸泡5分钟;85%乙醇中浸泡5分钟;75%乙醇中浸泡5分钟。
4. 洗涤:ddH2O浸泡5分钟,清洗3次。
5. 抗原修复(煮沸法):压力锅中加入足以淹没切片的10 mmol/L的枸橼酸盐缓冲液(pH 6.0)(配制:将复性剂溶于相应体积 ddH2O中,混匀),加热至沸腾,切片置耐热塑料切片架上,放入锅中,盖好锅盖,扣上压力阀,继续加热,设置保压3 min,时间到后打开放气阀放气,压力归零后开锅盖将内锅取出放置室温冷却,待溶液冷却至室温后取出切片(约30 min)。
6. 洗涤:ddH2O浸泡5分钟,清洗2次,PBST浸泡5分钟,清洗2次。
7. 灭活酶:每张切片滴加50 μl灭活酶试剂,室温避光处理15分钟。
8. 洗涤:PBST浸泡5分钟,清洗3次。(di一次迅速倒掉)
9. 封闭:每张切片滴加3% BSA-PBST 50 μl,湿盒中室温封闭30分钟。
10. 加一抗:弃去封闭液,每张切片滴加50 μl一抗,4℃湿盒中孵育过夜或37°C 1小时。
11. 复温:次日取出切片,室温复温40分钟。
12. 洗涤:PBST浸泡5分钟,清洗3次。(di一次迅速倒掉)
13. 加酶标二抗:每张切片滴加HRP标记的二抗(抗兔/小鼠)25μl,室温或37°C孵育30分钟。
14. 洗涤:PBST浸泡5分钟,清洗3次。(di一次迅速倒掉)
15. 显色(DAB法):每张切片滴加50 μl显色液(显色液配制:85% ddH2O+ 5% DAB缓冲液+5% DAB底物+5% DAB色原,避光现配现用,按需要量配制),湿盒中显色5分钟。
16. 终止显色:用蒸馏水终止显色反应。
17. 复染:每张切片滴加50 μl苏木素体细胞快速染色液,染色5分钟 ,用蒸馏水冲洗干净。
18. 脱色反蓝:将切片放入1%盐酸~乙醇中脱色3~5秒后迅速取出放入蒸馏水中终止,再放入PBST中反蓝5分钟。
19. 封片:分别在75%乙醇中浸泡5分钟;85%乙醇中浸泡5分钟;95%乙醇中浸泡5分钟;无水乙醇中浸泡5分钟。用二甲苯浸泡10分钟,更换二甲苯后再浸泡10分钟。之后在切片上加中性树胶,加盖玻片。
20. 观察:显微镜。
组份
复性剂(溶解前请混匀) HRP标记的二抗(抗兔/小鼠) DAB缓冲液(20×) DAB底物(20×) DAB色原(20×) 苏木素体细胞快速染色液
相关产品
结核菌杆抗体IgM(TB-AbIgM)Elisa Kit用途范围
NIFK 抗原(重组蛋白)
NIF3L1 抗原(重组蛋白)
科研使用癌/睾丸抗原62(CTAG62)原装Elisa试剂盒
NID2抗原(重组蛋白)
雌二醇(E2)Elisa分析检测试剂盒96T/48T
补体成分2(C2)国产Elisa试剂盒液体盒装
酶联文献胎盘蛋白(PP)Elisa检测试剂盒
酪酪肽3-36(PYY3-36)科研Elisa检测试剂盒用途范围
NHP2抗原(重组蛋白)
自主研发生产蛋白激酶R(PKR)国产Elisa试剂盒
NGF抗原(重组蛋白)
甲基化CpG结合蛋白2(MECP2)Elisa Kit免费待测服务
NGEF 抗原(重组蛋白)
干扰素诱导T细胞趋化因子(ITAC/CXCL11)Elisa Kit
关注
拨打电话
留言咨询