细胞系(株)复苏基本技术
(a)从液氮容器中取出细胞冻存管后,立即将细胞冻存管直接浸入37%水浴中,在1-2分钟内摇动细胞冻存管至冻存的细胞融化。
(b)用75%酒精消毒细胞冻存管后,小心打开盖子,用吸管吸出细胞悬浮液至15ml离心管中,缓慢加入5ml培养基后800rpm离心5分钟,弃上清,加3-5ml培养基重悬至细胞培养瓶中,然后放入5CO2、95%空气、37℃培养箱静置培养。
注:建议使用新鲜配制的培养体系
(c)另外,细胞计数,确定细胞数量
(d)24小时,更换一次培养液,继续在5%CO2, 95%空气、37℃培养箱静置培养。
注:建议使用新鲜配制的培养体系
注意事项:
1,将冻存管从液氮容器中取出时要做好防护工作,以免冻伤。
2,取冻存管后立即放入37℃水浴中,缩短解冻时间
3,复苏最好用新配制的细胞培养体系
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