酚氧化物酶(PO)酶联免疫分析
试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供研究使用。
检测范围: 96T
1.2pg/ml-50pg/ml
使用目的:
本试剂盒用于测定样本中酚氧化物酶(PO)含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中酚氧化物酶(PO)水平。用纯化的酚氧化物酶
(PO)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入酚氧化物酶(PO),
再与HRP 标记的酚氧化物酶(PO)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底
洗涤后加底物TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最
终的黄色。颜色的深浅和样品中的酚氧化物酶(PO)呈正相关。酚氧化物酶(PO)ELISA试剂盒用酶标仪在450nm 波长下
测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中酚氧化物酶(PO)浓度。
试剂盒组成
1 30 倍浓缩洗涤液20ml×1 瓶7 终止液6ml×1 瓶
2 酶标试剂6ml×1 瓶8 标准品(96pg/ml) 0.5ml×1 瓶
3 酶标包被板12 孔×8 条9 标准品稀释液1.5ml×1 瓶
4 样品稀释液6ml×1 瓶10 说明书1 份
5 显色剂A 液6ml×1 瓶11 封板膜2 张
6 显色剂B 液6ml×1/瓶12 密封袋1 个
标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能
马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3 的样品,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤
1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀
释。
48pg/ml 5 号标准品150μl 的原倍标准品加入150μl 标准品稀释液
24pg/ml 4 号标准品150μl 的5 号标准品加入150μl 标准品稀释液
12pg/ml 3 号标准品150μl 的4 号标准品加入150μl 标准品稀释液
6pg/ml 2 号标准品150μl 的3 号标准品加入150μl 标准品稀释液
3pg/ml 1 号标准品150μl 的2 号标准品加入150μl 标准品稀释液
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、
待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,
然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽
量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。
4. 配液:将30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水30 倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,酚氧化物酶(PO)ELISA试剂盒每孔加满洗涤液,静置30 秒后弃去,如此
重复5 次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色
10 分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。测定应在加终止
液后15 分钟以内进行。
操作程序总结:
计算
以标准物的浓度为横坐标,OD 值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的
OD 值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD 值计算出标
准曲线的直线回归方程式,将样品的OD 值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,
即为样品的实际浓度。
注意事项
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未
用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,酚氧化物酶(PO)ELISA试剂盒以避免试验误差。一次加样时间最好
控制在5 分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD 值
大于标准品孔第一孔的OD 值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n 倍)后再测定,计
算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5. 酚氧化物酶(PO)ELISA试剂盒封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
保存条件及有效期
1.试剂盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6 个月
GS-E30038 大鼠凝聚素(CLU)ELISA试剂盒 Rat Clusterin,CLU ELISA试剂盒
GS-E30039 大鼠转化生长因子β刺激蛋白22(TSC22)ELISA试剂盒 Rat transforming growth factor-beta-stimulated Protein clone-22,TSC22 ELISA试剂盒
GS-E30040 大鼠白介素32(IL-32)ELISA试剂盒 Rat Interleukin 32,IL-32 ELISA试剂盒
GS-E30041 大鼠孕酮受体(PROGR)ELISA试剂盒 Rat Progesterone receptor,PROGR ELISA试剂盒
GS-E30042 大鼠白介素21(IL-21)ELISA试剂盒 Rat Interleukin 21,IL-21 ELISA试剂盒
GS-E30043 大鼠D-乳酸脱氢酶(D-LDH)ELISA试剂盒 Rat D-Lactate Dehydrogenase,D-LDH ELISA试剂盒
GS-E30044 大鼠胸腺活化调节趋化因子(TARC/CCL17)ELISA试剂盒 Rat thymus activation regulated chemokine,TARC ELISA试剂盒
GS-E30045 大鼠胆固醇(CH)ELISA试剂盒 Rat cholesterol,CH ELISA试剂盒
GS-E30046 大鼠甘油三酯(TG)ELISA试剂盒 Rat Triglyceride,TG ELISA试剂盒
GS-E30047 大鼠低密度脂蛋白(LDL)ELISA试剂盒 Rat low density lipoprotein,LDL ELISA试剂盒
GS-E30048 大鼠高密度脂蛋白(HDL)ELISA试剂盒 Rat High density lipoprotein,HDL ELISA试剂盒
GS-E30049 大鼠孕酮受体(PGR)ELISA试剂盒 Rat progesterone receptor,PGR ELISA试剂盒
GS-E30050 大鼠血管紧张素Ⅱ转化酶(ACEⅡ)ELISA试剂盒 Rat Angiotensin Ⅱ converting enzyme,ACEⅡ ELISA试剂盒
GS-E30051 大鼠血管紧张素Ⅰ转化酶(ACEⅠ)ELISA试剂盒 Rat Angiotensin Ⅰ Converting Enzyme,ACEⅠ ELISA试剂盒
GS-E30052 大鼠促性腺激素释放激素受体(GnRHR)ELISA试剂盒 Rat Gonadotropin-releasing hormone receptor,GnRHR ELISA试剂盒
GS-E30053 大鼠磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA试剂盒 Rat Phosphorylated adenosine monophosphate activated protein kinase,AMPK ELISA试剂盒
GS-E30054 大鼠热休克蛋白47(HSP47)ELISA试剂盒 Rat heat shock protein,HSP47 ELISA试剂盒
GS-E30055 大鼠内源性糖皮质激素(GC)ELISA试剂盒 Rat glucocorticoid,GC ELISA试剂盒
GS-E30056 大鼠柠檬酸合酶(CS)ELISA试剂盒 Rat Citrate synthase,CS ELISA试剂盒
GS-E30057 大鼠L-鼠乳酸脱氢酶(L-LDH) ELISA试剂盒 Rat L-Lactate Dehydrogenase,L-LDH ELISA试剂盒
GS-E30058 大鼠脂酰辅酶A合成酶(ACS)ELISA试剂盒 Rat Fatty acyl-CoA synthetase,ACS ELISA试剂盒
GS-E30059 大鼠肉毒碱脂酰转移酶(CACT)ELISA试剂盒 Rat carnitine-acylcarnitine translocase,CACT ELISA试剂盒
GS-E30060 大鼠磷酸化乙酰辅酶A羧化酶(pACCase)ELISA试剂盒 Rat Phosphorylated acetyl-CoA catboxylase,pACCase ELISA试剂盒
GS-E30061 大鼠金属硫蛋白(MT)ELISA试剂盒 Rat Metallothionein,MT ELISA试剂盒
GS-E30062 大鼠心肌特异性肌钙蛋白T(cTnT)ELISA试剂盒 Rat cardiac isoform of Tropnin T,cTnT ELISA试剂盒
GS-E30063 大鼠乙酰胆碱酯酶(AChE)ELISA试剂盒 Rat Acetylcholinesterase,AChE ELISA试剂盒
GS-E30064 大鼠糖缺失性转铁蛋白(CDT)ELISA试剂盒 Rat carbohydrate-deficient transferrin,CDT ELISA试剂盒
GS-E30065 大鼠总胆汁酸(TBA)ELISA试剂盒 Rat Total bile acide,TBA ELISA试剂盒
GS-E30066 大鼠β2微球蛋白(BMG/β2-MG)ELISA试剂盒 Rat β2-microglobulin,BMG/β2-MG ELISA试剂盒
GS-E30067 大鼠视黄醇结合蛋白(RBP)ELISA试剂盒 Rat Retinol-binding protein,RBP ELISA试剂盒
GS-E30068 大鼠促性腺激素释放激素受体抗体(GNRHR-Ab)ELISA试剂盒 Rat anti-gonadotropin-releasing hormone receptor antibody,GNRHR-Ab ELISA试剂盒
GS-E30069 大鼠血管性血友病因子裂解蛋白酶(ADAMTS13/vWF-cp)ELISA试剂盒 Rat von Willebrand Factor cleaving protease,ADAMTS-13/vWF-cp ELISA试剂盒
GS-E30070 大鼠主要碱性蛋白(MBP)ELISA试剂盒 Rat major basic protein,MBP ELISA试剂盒
GS-E30071 大鼠嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)ELISA试剂盒 Rat eosinophil cationic protein,ECP ELISA试剂盒
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