人白细胞介素-8(IL-8)酶联免疫分析
试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供研究使用。
检测范围:人白细胞介素-8(IL-8)ELISA试剂盒 96T
40 ng/L -1200 ng/L
使用目的:
本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中白细胞介素-8(IL-8)含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人白细胞介素-8(IL-8)水平。用纯化的人白细胞介素-8(IL-8)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入白细胞介素-8(IL-8),再与HRP标记的白细胞介素-8(IL-8)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的白细胞介素-8(IL-8)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人白细胞介素-8(IL-8)浓度。
试剂盒组成
1
30倍浓缩洗涤液
20ml×1瓶
7
终止液
6ml×1瓶
2
酶标试剂
6ml×1瓶
8
标准品(2400 ng/L)
0.5ml×1瓶
3
酶标包被板
12孔×8条
9
标准品稀释液
1.5ml×1瓶
4
样品稀释液
6ml×1瓶
10
说明书
1份
5
显色剂A液
6ml×1瓶
11
封板膜
2张
6
显色剂B液
6ml×1/瓶
12
密封袋
1个
标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤
人白细胞介素-8(IL-8)ELISA试剂盒
1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
1200ng/L
5号标准品
150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
600 ng/L
4号标准品
150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
300 ng/L
3号标准品
150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
150 ng/L
2号标准品
150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
75 ng/L
1号标准品
150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
操作程序总结:
计算
人白细胞介素-8(IL-8)ELISA试剂盒
以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
注意事项
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书人白细胞介素-8(IL-8)ELISA试剂盒有异,以英文说明书为准。
保存条件及有效期
1.试剂盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6个月
人协同刺激分子受体(CMR)ELISA试剂盒 Human costimulatory molecules recptor,CMR ELISA试剂盒
人肽聚糖(PG)ELISA试剂盒 Human peptidoglycan,PG ELISA试剂盒
人脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)ELISA试剂盒 Human Lipoarabinomannan,LAM ELISA试剂盒
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人基质裂解素(ST3)ELISA试剂盒 Human Stromelysin-3,ST3 ELISA试剂盒
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人硫酸皮肤素(DS)ELISA试剂盒 Human dermatan sulfate,DS ELISA试剂盒
人硫酸类肝素(HS)ELISA试剂盒 Human heparan sulfate,HS ELISA试剂盒
人硫酸角质素(KS)ELISA试剂盒 Human keratan sulfate,KS ELISA试剂盒
人抗酿酒酵母抗体(ASCA)ELISA试剂盒 Human Anti-Saccharomyces cerevisiae antibody,ASCA ELISA试剂盒
人迟现抗原4(VLA4)ELISA试剂盒 Human very late appearing antigen 4,VLA4 ELISA试剂盒
人吖啶橙(AO)ELISA试剂盒 Human Acrine Orange,AO ELISA试剂盒
人甲胺喋呤(MTX)ELISA试剂盒 Human methotrexate,MTX ELISA试剂盒
人对氨基苯甲酸(PABA)ELISA试剂盒 Human para-aminobenzoic acid,PABA ELISA试剂盒
人苯丙氨酸(LPA)ELISA试剂盒 Human L-phenylalanine,LPA ELISA试剂盒
人免疫核糖核酸(Irna)ELISA试剂盒 Human Immune RNA,Irna ELISA试剂盒
人β萘酚(β-Nph)ELISA试剂盒 Human Beta-naphthol,β-Nph ELISA试剂盒
人β内酰胺酶抑制剂(BLI)ELISA试剂盒 Human β-Lactamase inhibitors,BLI ELISA试剂盒
人α半乳糖基抗体(Gal)ELISA试剂盒 Human α-galactoyl,Gal ELISA试剂盒
人αN已酰氨基葡糖苷酶(αNAG)ELISA试剂盒 Human αN-acetylglucosaminidase,αNAG ELISA试剂盒
人α2纤溶酶抑制物(α2-PI)ELISA试剂盒 Human α2-plasmin inhititor,α2-PI ELISA试剂盒
人烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)ELISA试剂盒 人高香草酸(HVA) ELISA试剂盒
人钙粘蛋白相关的神经受体1(CNR-1)ELISA试剂盒 Human cadherln-related neuronal receptor1,CNR-1 ELISA试剂盒
人毛细血管扩张性共济失调突变基因(ATM)ELISA试剂盒 Human Ataxia telangiectasia mutated,ATM ELISA试剂盒
人芳香烃受体(AhR)ELISA试剂盒 Human aryl hydrocarbon receptor,AhR ELISA试剂盒
人特异性巨噬细胞武装因子(SMAF)ELISA试剂盒 Human Specifie Macrophage Arming Paetot,SMAF ELISA试剂盒
人促有丝分裂因子(MF/MPF)ELISA试剂盒 Human maturation promoting factor,MF/MPF ELISA试剂盒
人转录因子抗体-1(ATF-1)ELISA试剂盒 Human activating transcription factor-1,ATF-1 ELISA试剂盒
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