人补体3a(C3a)酶联免疫分析
试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供研究使用。
检测范围: 96T
8μg/ml - 160μg/ml
使用目的:
人补体3a(C3a)ELISA试剂盒
本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中补体3a(C3a)含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人补体3a(C3a)水平。用纯化的人补体3a(C3a)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入补体3a(C3a),再与HRP标记的补体3a(C3a)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的补体3a(C3a)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人补体3a(C3a)浓度。
试剂盒组成
1
30倍浓缩洗涤液
20ml×1瓶
7
终止液
6ml×1瓶
2
酶标试剂
6ml×1瓶
8
标准品(320μg/ml)
0.5ml×1瓶
3
酶标包被板
12孔×8条
9
标准品稀释液
1.5ml×1瓶
4
样品稀释液
6ml×1瓶
10
说明书
1份
5
显色剂A液
6ml×1瓶
11
封板膜
2张
6
显色剂B液
6ml×1/瓶
12
密封袋
1个
标本要求
人补体3a(C3a)ELISA试剂盒
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤
1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
160μg/ml
5号标准品
150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
80μg/ml
4号标准品
150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
40μg/ml
3号标准品
150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
20μg/ml
2号标准品
150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
10μg/ml
1号标准品
150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
操作程序总结:
人补体3a(C3a)ELISA试剂盒
计算
以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
注意事项
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
保存条件及有效期
人补体3a(C3a)ELISA试剂盒
1.试剂盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6个月
人原钙黏素1(PCDH1)ELISA试剂盒 Human protocadherin 1,PCDH1 ELISA试剂盒
人白介素2受体(IL-2R)ELISA试剂盒 Human Interleukin-2 receptor,IL-2R ELISA试剂盒
人皮肤T细胞虏获趋化因子(CTACK/CCL27)ELISA试剂盒 Human cutaneous T cell-attracting chemokine,CTACK ELISA试剂盒
人胸肾表达趋化因子(BRAK/CXCL14)ELISA试剂盒 Human Breast and kidney expressed chemokine,BRAK ELISA试剂盒
人B-淋巴细胞趋化因子1(BLC-1/CXCL13)ELISA试剂盒 Human B-Lymphocyte Chemoattractant 1,BLC-1 ELISA试剂盒
人结缔组织活化肽Ⅲ(CTAPⅢ)ELISA试剂盒 Human connective tissue-activating peptide Ⅲ,CTAPⅢ ELISA试剂盒
Human Macrophage Colony-Stimulating Factor Receptor,M-CSFR ELISA试剂盒
人免疫球蛋白A Fc段受体Ⅰ(FcαRⅠ/CD89)ELISA试剂盒 Human Receptor Ⅰ for the Fc region of immunoglobulin A,FcαRⅠ ELISA试剂盒
人免疫球蛋白E Fc段受体Ⅱ(FcεRⅡ/CD23)ELISA试剂盒 Human Receptor Ⅱ for the Fc region of immunoglobulin E,FcεRⅡ ELISA试剂盒
人免疫球蛋白G Fc段受体Ⅲ(FcγRⅢ/CD16)ELISA试剂盒 Human Receptor Ⅲ for the Fc region of immunoglobulin G,FcγRⅢ ELISA试剂盒
人免疫球蛋白G Fc段受体Ⅱ(FcγRⅡ/CD32)ELISA试剂盒 Human Receptor Ⅱ for the Fc region of immunoglobulin G,FcγRⅡ ELISA试剂盒
人免疫球蛋白G Fc段受体Ⅰ(FcγRⅠ/CD64)ELISA试剂盒 Human Receptor Ⅰ for the Fc region of immunoglobulin G,FcγRⅠ ELISA试剂盒
人免疫球蛋白G Fc段受体Ⅲ(FcγRⅢ/CD16)ELISA试剂盒 Human Receptor Ⅲ for the Fc region of immunoglobulin G,FcγRⅢ ELISA试剂盒
人免疫球蛋白G Fc段受体Ⅱ(FcγRⅡ/CD32)ELISA试剂盒 Human Receptor Ⅱ for the Fc region of immunoglobulin G,FcγRⅡ ELISA试剂盒
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人粒细胞趋化蛋白-2(GCP-2/CXCL6)ELISA试剂盒 Human granulocyte chemotactic protein-2,GCP-2 ELISA试剂盒
Human Interferon ω,IFN-ω ELISA试剂盒
人糖基化依赖的细胞黏附分子(GlyCAM-1)ELISA试剂盒 Human glycosylation-dependent cell adhesion molecule-1,GlyCAM-1 ELISA试剂盒
人干扰素调节因子(IRF)ELISA试剂盒 Human interferon Regulatory Factor,IRF ELISA试剂盒
人淋巴毒素β(LTB)ELISA试剂盒 Human lymphotoxinβ,LTB ELISA试剂盒
人淋巴毒素α(LTA)ELISA试剂盒 Human lymphotoxinα,LTA ELISA试剂盒
人CC趋化因子受体1(CCR1)ELISA试剂盒 Human CC-chemokine receptor 1,CCR1 ELISA试剂盒
人CX3C趋化因子受体1(CX3CR1)ELISA试剂盒 Human CX3C-chemokine receptor 1,CX3CR1 ELISA试剂盒
人肺部活化调节趋化因子(PARC/CCL18)ELISA试剂盒 Human pulmonary activation regulated chemokine,PARC ELISA试剂盒
人黏膜地址素细胞黏附分子(MAdCAM-1)ELISA试剂盒 Human mucosal addressin cell adhesion molecule-1,MAdCAM-1 ELISA试剂盒
人β干扰素(IFN-β/IFNB)ELISA试剂盒 Human Interferon β,IFN-β/IFNB ELISA试剂盒
人可溶性CD38(sCD38)ELISA试剂盒 Human Soluble Cluster of differentiation 38,sCD38 ELISA试剂盒
人可溶性CD21(CR2/sCD21)ELISA试剂盒 Human Soluble Cluster of differentiation 21,sCD21 ELISA试剂盒
人可溶性瘦素受体(sLR)ELISA试剂盒 Human Leptin Soluble Receptor,sLR ELISA试剂盒
人Toll样受体9(TLR-9/CD289)ELISA试剂盒 Human Toll-like receptor 9,TLR-9 ELISA试剂盒
人转化生长因子β2(TGFβ2)ELISA试剂盒 Human transforming growth factors β2,TGFβ2 ELISA试剂盒
人单核细胞趋化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA试剂盒 Human monocyte chemotactic protein 4,MCP-4 ELISA试剂盒
人白三烯D4(LTD4)ELISA试剂盒 Human leukotriene D4,LT-D4 ELISA试剂盒
人N钙黏蛋白/神经钙黏蛋白(N-Cad)ELISA试剂盒 Human Neural-Cadherin, N-Cad ELISA试剂盒
Human heparin-binding epidermal growth factor-like growth factor,HB-EGF ELISA试剂盒
人红细胞刺激因子(ESF)ELISA试剂盒 Human erythropoiesis stimulating factor,ESF ELISA试剂盒
人肿瘤坏死因子相关激活诱导因子(TRANCE)ELISA试剂盒 Human TNF related activation induced cytokine,TRANCE ELISA试剂盒
人生长激素释放因子(GH-RF)ELISA试剂盒 Human growth hormone relasing factor,GH-RF ELISA试剂盒
人巨噬细胞趋化因子(MCF)ELISA试剂盒 Human macrophage chemotatic factor,MCF ELISA试剂盒
人α/β干扰素受体(IFN-α/βR)ELISA试剂盒 Human Interferon α/βReceptor,IFN-α/βR ELISA试剂盒
人B细胞生长因子(BCGF)ELISA试剂盒 Human B cell growth protein,BCGF ELISA试剂盒
人B细胞分化因子(BCDF)ELISA试剂盒 Human B cell differetiation factor,BCDF ELISA试剂盒
人上皮细胞粘附分子(Ep-CAM/CD362)ELISA试剂盒 Human Epithelial Cell Adhesion Molecule,Ep-CAM ELISA试剂盒
人可溶性粘附分子(Sam)ELISA试剂盒 Human soluble adhesion molecules,Sam ELISA试剂盒
人巨噬细胞替代激活相关化学因子1(AmAC-1)ELISA试剂盒 Human Alternative macrophage activation-associated CC chemokine 1,AmAC-1 ELISA试剂盒
人可溶性血管内皮生长因子受体2(VEGFR-2/sFLK-1)ELISA试剂盒 Human soluble vascular endothelial growth factor receptor-2,VEGFR-2/sFLK-1 ELISA试剂盒
人胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)ELISA试剂盒 Human thymic stromal lymphopoietin,TSLP ELISA试剂盒
人穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)ELISA试剂盒 Human Perforin/Pore-forming protein,PF/PFP ELISA试剂盒
人多效生长因子(PTN)ELISA试剂盒 Human pleiotrophin,PTN ELISA试剂盒
人可溶性CD28(sCD28)ELISA试剂盒 human soluble cluster of differentiation 28,sCD28 ELISA试剂盒
人淋巴细胞因子ELISA试剂盒 Human lymphocyte factor ELISA试剂盒
人胸腺活化调节趋化因子(TARC/CCL17)ELISA试剂盒 Human thymus activation regulated chemokine,TARC ELISA试剂盒
人神经细胞粘附分子配体1(NCAM-L1/CD171)ELISA试剂盒 Human Neural cell adhesion molecule ligand 1,NCAM-L1 ELISA试剂盒
人神经保护因子(CVNPF)ELISA试剂盒 Human Cobra venom neuronal protective factor,CVNPF ELISA试剂盒
人可溶性肿瘤坏死因子α受体(sTNFαR)ELISA试剂盒 Human soluble Tumor Necrosis Factorαreceptor,sTNFαR ELISA试剂盒
人可溶性细胞因子受体(sCKR)ELISA试剂盒 Human soluble cytokine receptor,sCKR ELISA试剂盒
人可溶性凋亡相关因子配体(sFASL)ELISA试剂盒 Human soluble Factor-related Apoptosis ligand,sFASL/Apo-1 ELISA试剂盒
人细胞凋亡抑制因子(IAP)ELISA试剂盒 Human inhibitor of apoptosis,IAP ELISA试剂盒
人集落刺激因子(CSF)ELISA试剂盒 Human colony-stimulating factor,CSF ELISA试剂盒
人γ干扰素诱导单核细胞因子(MIGF/CXCL9)ELISA试剂盒 Human monocyte interferon gamma inducing factor,MIGF ELISA试剂盒
人干扰素诱导T细胞趋化因子(ITAC/CXCL11)ELISA试剂盒 Human Interferon inducible T-cell Chemoattractant,I-TAC ELISA试剂盒
人CD14分子(CDl4)ELISA试剂盒 Human cluster Of differentiation,CDl4 ELISA试剂盒
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